| 摘 要： | 目的探讨莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉血内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用,并进一步研究莱菔硫烷在保护内皮细胞损伤中的机制。方法复苏由中国科学院上海细胞库提供的人脐静脉内皮细胞株,37℃、5%CO2条件下培养细胞至80%以上融合度时,分组进行干预。实验分组:(1)空白对照组(对照组):细胞正常培养2.5 h;(2)过氧化氢组(H_2O_2组):分别给予100、200、400、600、800μmol/L浓度培养细胞2 h,选择400μmol/L为其最佳干预浓度(后续各组如未特殊注明,默认H_2O_2浓度为400μmol/L);(3)莱菔硫烷+过氧化氢组(SFN+H_2O_2组):不同浓度SFN(2.5、5、10μmol/L)预孵育30 min后,加入400μmol/L的H_2O_2继续培养2 h。收集干预后的各组细胞,用MTT法比较细胞活性,流式细胞技术测定细胞内ROS水平,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR法)测定细胞内转录因子核因子E2(Nrf2)m RNA和血红素加氧酶-1(HO-1) mRNA表达情况。结果与对照组相比,H_2O_2组MTT法测定的细胞吸光光度值(A值)降低(P0.05),并浓度依赖性的使A值下降,SFN+H_2O_2组细胞吸光光度值高于H_2O_2组(P0.05)。H_2O_2组ROS水平高于对照组(P0.05),SFN+H_2O_2组ROS水平低于H_2O_2组(P0.05)。H_2O_2组Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA表达水平低于对照组(P0.05),SFN+H_2O_2组Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA表达水平高于H_2O_2组(P0.05)。结论莱菔硫烷对过氧化氢致HUVEC的氧化损伤有保护作用,其机制可能与莱菔硫烷在转录水平激活Nrf2/HO-1表达有关。
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