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大鼠骨髓间充质干细胞的培养与鉴定
引用本文:李晓峰,赵劲民,苏伟,崔向荣,罗世兴,马爱国. 大鼠骨髓间充质干细胞的培养与鉴定[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2011, 15(10). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.10.003
作者姓名:李晓峰  赵劲民  苏伟  崔向荣  罗世兴  马爱国
作者单位:广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科,广西壮族自治区南宁市,530021
基金项目:国家自然科学基金项目(30860078)课题名称:电场促进骨髓间充质干细胞扩增的蛋白质组学研究.广西医疗卫生重点科研项目(桂卫重200636):组织工程种子细胞的实验研究
摘    要:背景:骨髓间充质干细胞在骨髓中含量极低,体外培养难度较大.体外分离培养纯度高、活力强、生物特性均一的间充质干细胞,对组织工程及细胞的体内、体外实验显得至关重要.目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化方法,并进行细胞形态学观察、表面标志物鉴定及多向分化能力检测.方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,进行形态学观察,绘制生长曲线,细胞周期分析,流式细胞仪检测细胞表面标记物,分别向成骨、成脂方向诱导分化.结果与结论:大鼠骨髓间充质干细胞生长以梭形细胞为主,呈放射状排列的细胞集落,细胞生长旺盛,可连续稳定传代10代以上.生长曲线及细胞周期显示骨髓间充质干细胞符合正常细胞生长特征且生长活跃.第3代骨髓间充质干细胞CD44,CD90,CD105均呈阳性表达,而CD34,CD45呈阴性表达.成脂、成骨诱导后,油红O染色、碱性磷酸酶染色、von Kossa法染色和茜素红染色均呈阳性.全骨髓贴壁培养法操作简单,可大量分离、纯化、扩增骨髓间充质干细胞,所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性,经诱导培养后具有多向分化潜能.实验所用的全骨髓贴壁法法为组织工程提供充足的种子细胞来源具有重要的现实意义.

关 键 词:骨髓间充质干细胞  原代培养  形态学  分化  鉴定

Culture and identification of rat bone marrow mesenchymal stem cells
Li Xiao-feng,Zhao Jin-min,Su Wei,Cui Xiang-rong,Luo Shi-xing,Ma Ai-guo. Culture and identification of rat bone marrow mesenchymal stem cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2011, 15(10). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.10.003
Authors:Li Xiao-feng  Zhao Jin-min  Su Wei  Cui Xiang-rong  Luo Shi-xing  Ma Ai-guo
Abstract:
Keywords:
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