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表达胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA腺相关病毒载体的构建和高滴度病毒制备
引用本文:徐世平,吴本俨,王孟薇,高利利,伍银桥,蒋立新,王卫华,尤纬缔. 表达胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA腺相关病毒载体的构建和高滴度病毒制备[J]. 世界华人消化杂志, 2007, 15(12): 1417-1420
作者姓名:徐世平  吴本俨  王孟薇  高利利  伍银桥  蒋立新  王卫华  尤纬缔
作者单位:解放军总医院南楼消化科,北京市,100853;北京本元正阳基因技术有限公司,北京市,100176
摘    要:目的:构建一个表达胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA的重组腺相关病毒载体,制备能靶向性抑制GCRG213表达的重组腺相关病毒.方法:将构建好并经验证的包含胃癌相关基因GCRG213特异性小干扰RNA片段GCRG213-RNAi-2的IMG800-GCRG213i-2质粒用Bam H I Bg/Ⅱ双酶切,回收410 bp左右目的片段,将pSNAV2.0质粒用BamH I单酶切后同目的片段连接,经酶切和测序鉴定后,用新建质粒脂质体转染BHK-21细胞,G418筛选后大规模培养,再用辅助病毒HSV1-rc/△UL2感染,获取病毒.结果:成功构建包含U6启动子和胃癌相关基因GCRG213特异性RNA干扰片段的重组腺相关病毒载体,并制备出滴度为5×10~(12)vector genome/L高滴度腺相关病毒.结论:载体的构建为进一步研究GCRG213的体内功能打下了基础,也将为更多的基因干预和基因的功能研究提供有效的工具.

关 键 词:胃癌  GCRG213基因  腺相关病毒  siRNA  基因转染
收稿时间:2007-03-06
修稿时间:2007-03-06

Construction of recombined adeno-associated virus vector expressing GCRG213 short interference RNA and preparation of high-titer virus
Shi-Ping Xu,Ben-Yan Wu,Meng-Wei Wang,Li-Li Gao,Yin-Qiao Wu,Li-Xin Jiang,Wei-Hua Wang,Wei-Di You. Construction of recombined adeno-associated virus vector expressing GCRG213 short interference RNA and preparation of high-titer virus[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2007, 15(12): 1417-1420
Authors:Shi-Ping Xu  Ben-Yan Wu  Meng-Wei Wang  Li-Li Gao  Yin-Qiao Wu  Li-Xin Jiang  Wei-Hua Wang  Wei-Di You
Abstract:
Keywords:Gastric cancer  GCRG213 gene  Adeno-associated virus  Short interference RNA  Gene transfection
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