| 人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 温儒民,刘俊杰,陈家存,胡书群,裴东生.人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达[J].徐州医学院学报,2005,25(4):305-308. |
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| 作者姓名： | 温儒民 刘俊杰 陈家存 胡书群 裴东生 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,221002
2. 徐州医学生物化学与分子生物学研究中心,江苏,徐州,221002 |
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| 基金项目： | 江苏省教育厅资助课题（00KJD320001） |
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| 摘 要： | 目的克隆人IL-10 cDNA的全长序列，构建原核表达载体并诱导其表达。方法无菌条件下静脉采取正常人外周血10ml。加入等体积的生理盐水稀释后，加入淋巴细胞分离液，离心收集细胞，提取细胞总RNA。以细胞总RNA为模板，进行RT—PCR，克隆出IL-10 cDNA，经双酶切后插入表达载体pMon中，用pMon—IL10重组体转染大肠杆菌DH5a。用萘啶酮酸诱导使重组人IL-10在大肠杆菌中表达，对表达产物进行SDS—PAGE电泳及Western—blot分析。结果人外周血单核细胞经ConA刺激后，IL—10转录水平增加，有利于IL-10 cDNA的克隆；克隆的IL-10 cDNA经测序证实与基因库报告的序列完全一致，插入pMon载体后经萘啶酮酸诱导能够在大肠杆菌DH5a表达；表达的蛋白质能与兔抗人IL—10特异性结合。结论人IL-10 cDNA被成功克隆并能够在大肠杆菌中表达。
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| 关 键 词： | 白细胞介素-10 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-2065（2005）04-0305-04 |
| 收稿时间： | 12 27 2004 12:00AM |
| 修稿时间： | 2004-12-27 |
Expression of human IL- 10 cDNA in E. coil |
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| Wen RuMin;Liu JunJie;Chen GuCun;Hu ShuQun;Pei DongSheng.Expression of human IL- 10 cDNA in E. coil[J].Acta Academiae Medicinae Xuzhou,2005,25(4):305-308. |
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| Authors: | Wen RuMin;Liu JunJie;Chen GuCun;Hu ShuQun;Pei DongSheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human interleukin-10 cloning expression |
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