| 一种具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白的纯化与N端氨基酸序列分析 |
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| 引用本文： | 王厚伟. 一种具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白的纯化与N端氨基酸序列分析[J]. 医学教育探索, 2008, 0(9) |
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| 作者姓名： | 王厚伟 |
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| 作者单位： | 山东中医药大学药学院 |
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| 基金项目： | 山东省教育厅资助项目，山东省优秀中青年科学家研究奖励基金，山东省中药理论与技术创新团队资助项目 |
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| 摘 要： | 目的分离纯化具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白,分析其对胰蛋白酶的抑制活性、抑制机制与N端氨基酸序列。方法采用以胰蛋白酶为配体的亲和色谱和Sephadex G-50凝胶过滤法,从半夏蛋白粗提液的40%(NH_4)_2SO_4沉淀中分离纯化活性半夏蛋白;采用12%SDS-PAGE鉴定其纯度,并估算其相对分子质量;采用Ed-man降解法分析其N-端氨基酸序列。结果纯化的活性半夏蛋白经SDS-PAGE检测呈现单一条带,相对分子质量为1.4×10～4;比活力为1059.012U/mg,活力回收率为24.40%;对胰蛋白酶的质量抑制比为1:4.72,抑制常数(Ki)为7.17×10～(-6)mol/L;其N端前6个氨基酸残基顺序为DPVVDG。结论该活性半夏蛋白是一种丝氨酸蛋白酶抑制刺,为胰蛋白酶的竞争性抑制剂。
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| 关 键 词： | 半夏蛋白 胰蛋白酶抑制剂 分离纯化 N端氨基酸序列 |
Purification of a protein with trypsin-inhibiting activity from Rhizoma Pinelliae and analysis of its N-terminal amino acid sequence |
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| WANG Hou-wei. Purification of a protein with trypsin-inhibiting activity from Rhizoma Pinelliae and analysis of its N-terminal amino acid sequence[J]. Researches in Medical Education, 2008, 0(9) |
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| Authors: | WANG Hou-wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rhizoma Pinelliae protein trypsin inhibitor isolation and purification N-terminal amino acid sequence |
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