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多球壳菌素诱导系膜细胞凋亡及对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响
引用本文:陈美,江警予,郝燕,周建华. 多球壳菌素诱导系膜细胞凋亡及对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响[J]. 医学教育探索, 2008, 0(8)
作者姓名:陈美  江警予  郝燕  周建华
作者单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,武汉市中心医院药剂科
基金项目:国家自然科学基金资助项目,湖北省科技攻关项目
摘    要:目的观察多球壳菌素(ISP-1)对体外培养的正常大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的促凋亡作用,研究ISP-1对细胞周期调节蛋白基因表达谱和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法体外培养大鼠GMC,加入100μmol/L ISP-1干预,分别于作用6、12、24、48 h后以流式细胞术检测GMC凋亡,Hoechst33258/PI染色观察凋亡细胞形态变化,琼脂糖DNA凝胶电泳法观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象,并通过SuperArray Real-Time PCR细胞周期基因芯片测定ISP-1对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响,Western blotting法观察Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果ISP-1可显著诱导GMC凋亡,并呈一定的时间依赖性,作用48 h后细胞凋亡最显著,Hoechst33258/PI荧光染色法可见亮蓝色的凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡梯度的出现;PCR细胞周期基因芯片检测结果发现ISP-1可显著上调GMC Rad51、Atm、Brcal、Caspase3、cyclinA2、cyclinC、chek1、cyclinB1、cyclinB2、cyclinD2、cyclinF、Cdc25a和P27等一些与DNA损伤、凋亡和细胞周期调节蛋白相关的基因的表达;Western blotting发现ISP-1可显著上调GMC Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。结论ISP-1可时间依赖性诱导体外培养的正常大鼠GMC凋亡,其机制与影响细胞周期调节蛋白及凋亡相关基因的表达有关。

关 键 词:多球壳菌素(ISP-1)  肾小球系膜细胞(GMC)  凋亡  细胞周期调节蛋白

Induction of myriocin on apoptosis and effect of myriocin on gene expression profiles of cell cycle regulatory proteins in glomerular mesangial ceils
CHEN Mei,JIANG Jing-yu,HAO Yan,ZHOU Jian-hua. Induction of myriocin on apoptosis and effect of myriocin on gene expression profiles of cell cycle regulatory proteins in glomerular mesangial ceils[J]. Researches in Medical Education, 2008, 0(8)
Authors:CHEN Mei  JIANG Jing-yu  HAO Yan  ZHOU Jian-hua
Abstract:
Keywords:myriocin(ISP-1)  glomerular messangial cell(GMC)  apoptosis  cell cycle regulatory proteins
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