含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建 |
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引用本文: | 罗威,黄文广,殷涛.含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建[J].郑州大学学报(医学版),2005,40(3):473-476. |
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作者姓名: | 罗威 黄文广 殷涛 |
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作者单位: | 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科,武汉,430022 |
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摘 要: | 目的:构建含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体。方法:利用PCR技术从人乳癌细胞MCF-7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pMD18T载体中,再从pMD18T-DF3重组质粒中切下DF3/MUC1启动子的转录调控序列并亚克隆入pGL3-Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3。从质粒pIBI30-DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pG13-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3-DF3-DTA。结果:构建了含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符。结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功。
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关 键 词: | DF3/MUC1 转录调控序列 白喉毒素A链 克隆 重组质粒 乳癌 |
修稿时间: | 2005年1月11日 |
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