血管紧张素Ⅱ调节肾脏球旁器颗粒细胞合成肾素的机制研究

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对肾脏球旁器颗粒细胞肾素分泌的调节作用。 方法 密度梯度离心原代分离小鼠肾小球球旁器颗粒细胞（JGC）。实时定量PCR法检测JGC内血管紧张素转换酶（ACE）、AngⅡ受体（AT）1型和2型（AT1和AT2） mRNA表达。不同浓度的AngⅡ与球旁器细胞共孵育后，放射免疫法测定上清中肾素活性；实时定量PCR法测定细胞内肾素mRNA表达；化学发光法测定细胞内、外环磷酸腺苷（cAMP)水平的剂量和时间效应。改变细胞内钙离子浓度后，观察JGC内和上清中cAMP浓度改变。实时定量PCR法检测AngⅡ对JGC内腺苷酸环化酶（AC）5和AC6 mRNA表达的影响。 结果 成功分离的JGC存在ACE、AT基因表达。AngⅡ可抑制JGC肾素分泌[（370.6±36.9）比（299.6±25.7） ng AngI&#8226;ml-1&#8226;h-1，P = 0.014]，并能抑制基础状态和前列腺素E2、去甲肾上腺素诱导的肾素mRNA表达。AngⅡ剂量依赖地降低JGC内和上清中cAMP水平。内质网上的Ca-ATP泵抑制剂毒胡萝卜内酯和环盐酸吗甲吡嗪酸均能剂量依赖地降低cAMP水平。细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM可降低细胞内钙离子浓度，进而使细胞内cAMP水平显著升高[（11.09±0.48）比（3.55±0.47） nmol/L，P < 0.01]。AngⅡ能通过减少42.12%的AC5 mRNA 表达，进而抑制肾素分泌。 结论 AngⅡ直接抑制肾素分泌可能是通过影响AC5，进而抑制cAMP表达来实现的。JGC内调节肾素分泌过程中，钙离子途径和GSα-cAMP两大信号传导途径中存在交联对话。