双膦酸盐诱导骨巨细胞瘤细胞凋亡的实验研究

目的　探讨双膦酸盐（唑来膦酸）对骨巨细胞瘤多核巨细胞和基质细胞的诱导凋亡作用。方法　对我院收治的７例唑来膦酸治疗前后患者的肿瘤组织切片进行透射电镜观察和ＴＵＮＥＬ凋亡染色及图像分析。另１０例未予唑来膦酸治疗的患者，取术中切除的骨巨细胞瘤新鲜组织进行细胞原代培养，分别给予５、３０、１５０μｍｏｌ／Ｌ唑来膦酸诱导肿瘤细胞凋亡４８ｈ，倒置相差显微镜观察细胞形态，Ａｎｎｅｘｉｎ-ＶＦＩＴＣ凋亡染色及流式细胞仪定量分析。结果　唑来膦酸治疗后的肿瘤组织切片透射电镜观察到多核巨细胞和基质细胞呈明显的凋亡表现；ＴＵＮＥＬ染色呈强阳性；基质细胞凋亡率治疗前为１.３１％，治疗后３３.４２％（Ｐ＝０.０１８）；多核巨细胞凋亡率治疗前为８.４１％，治疗后５６.８３％（Ｐ＝０.０１８）。在原代培养的骨巨细胞瘤基质细胞中予不同浓度的唑来膦酸诱导凋亡４８ｈ后，细胞数量减少，部分细胞形态有显著变化；Ａｎｎｅｘｉｎ-ＶＦＩＴＣ凋亡染色及流式细胞仪定量分析结果显示，对照组以及５、３０、１５０μｍｏｌ／Ｌ唑来膦酸诱导组的凋亡率分别为（１０.６７±２.１５）％、（２０.４７±３.７７）％、（４４.２１±８.３４）％和（５６.９６±９.６８）％，各诱导组显著高于对照组（Ｐ＜０.０５），且凋亡率呈剂量依赖性（ｒ＝０.７７５，Ｐ＝０.０００）。结论　双膦酸盐能够诱导骨巨细胞瘤基质细胞和多核巨细胞的凋亡，且骨巨细胞瘤基质细胞的凋亡率呈剂量依赖性，因此，双膦酸盐可以作为骨巨细胞瘤辅助治疗的方法之一。

Experimental study of bisphosphonate(zoledronate) inducing apoptosis of giant cell tumor of bone stromal cell and multinucleated giant cells

Objective To investigate the feasibility of bisphosphonates(zoledronate) inducing apoptosis of giant cell tumor of bone(GCTB)stromal cell and multinucleated giant cells. MethodsIn this study,the feasibility of zoledronate inducing apoptosis of GCTB stromal cell and multinucleated giant cells of GCTB was explored with cell culture,microscopy,electron microscopy and TUNEL apoptosis staining and image analysis,flow cytometry quantitative analysis of Annexin-V apoptosis index.GCTB specimens were collected at th...