零下非结冰抑制线粒体途径相关的细胞凋亡成功保存生物人工肝用L02细胞 |
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引用本文: | 李庆勇,牛锁成,张清华,李运田,李安全,林虎,杜大勇,高毅.零下非结冰抑制线粒体途径相关的细胞凋亡成功保存生物人工肝用L02细胞[J].中国老年学杂志,2013,33(9). |
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作者姓名: | 李庆勇 牛锁成 张清华 李运田 李安全 林虎 杜大勇 高毅 |
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作者单位: | 1. 解放军305医院老年病中心 2. 濮阳市人民医院心内二科,河南 濮阳,457000 3. 南方医科大学珠江医院肝胆二科 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划)基金资助项目,全军医学科研"十一五"计划专项基金资助项目 |
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摘 要: | 目的 比较常规低温(4℃及0℃)及零下非结冰温度(-0.8℃)保存L-02肝细胞时Bcl-2/Bax基因和蛋白表达的差异及与低温保存引起细胞凋亡的关系.方法 L-02细胞分为3组:-0.8C组(零下非结冰组),0°C组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术),检测LDH、ALT释放及凋亡基因Bcl-2与Bax的mRNA及蛋白定量表达并计算Bcl-2/Bax比值.结果 零下非结冰组较0℃组及4℃组显著提高了低温保存72 h的L-02细胞存活率(70.95%±3.33%)vs(65.9%±3.22%)、(61.02%±3.37%),均P<0.05];降低了细胞凋亡率(5.82%±1.68%)vs(8.53%±1.67%)、(9.40%±2.57%),均P<0.05];抑制了LDH(101.50±6.58) U/L vs(127.67±12.09)U/L、(150.13±11.38) U/L,均P<0.05]与ALT释放(6.07±0.63) U/L vs (7.00 ±0.60) U/L、(8.63±1.25) U/L,P <0.05];提高了L-02细胞Bcl-2基因mRNA及蛋白表达(均P<0.05),降低了Bax基因mRNA及蛋白表达(均P<0.05),Bcl-2/Bax指数上升(均P<0.05).结论 同常规低温保存相比,零下非结冰可显著提高肝细胞低温保存后细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡.零下非结冰降低了低温源性细胞凋亡的机制可能同Bcl-2基因表达增加、Bax基因表达降低即Bcl-2/Bax比值上升有关.
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关 键 词: | 生物人工肝 零下非结冰 细胞凋亡 Bcl-2/Bax 比值 |
Inhibiting mitochondrial-associated apoptosis contributes to the successful storage of hepatocytes for bioartificial liver at a subzero nonfreezing temperature |
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Abstract: | |
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