| 人白细胞介素29在cos-7细胞中表达及其体外抗乙型肝炎病毒作用 |
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| 引用本文： | 陈兵,罗欣,鲁云霞,徐从贞,张胜权.人白细胞介素29在cos-7细胞中表达及其体外抗乙型肝炎病毒作用[J].中国免疫学杂志,2007,23(5):411-414. |
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| 作者姓名： | 陈兵 罗欣 鲁云霞 徐从贞 张胜权 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥,230032 |
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| 摘 要： | 目的：克隆人细胞因子IL-29全长cDNA及其在cos-7细胞中表达，并初步探讨表达产物体外抗乙肝病毒（HBV）作用。方法：分离外周血单个核细胞；VSV感染后，提取总RNA，通过一步法RT-PCR获得IL-29全长cDNA。DNA测序正确后，将IL-29 cDNA的编码框序列构建到真核表达载体psectagB/His-myc中。氨苄青霉素板筛选及PCR鉴定，挑出阳性克隆进行扩增、转染cos-7细胞并经潮霉素及有限稀释法筛选稳定表达克隆。SDS-PAGE、Western blot鉴定，Ni2＋亲和层析分离纯化得到主带分子量为33000组氨酸标签重组人IL-29融合蛋白。体外以HepG2.2.2.15为靶细胞观察rhIL-29对HepG2.2.2.15培养上清液中HBV表面抗原（HBsAg）及e抗原（HBeAg）影响。结果：成功获得人IL-29全长cDNA并在cos-7细胞中稳定表达。SDS-PAGE、Western blot分析显示表达的rhIL-29融合蛋白为几个蛋白质区带，分子量在20000-33000之间纯化的rhIL-29融合蛋白，主带在33000附近。rhIL-29融合蛋白具有抑制HBsAg及HBeAg分泌作用并且具有剂量效应，抑制率分别达85%。结论：获得具有生物活性的rhIL-29融合蛋白。rhIL-29融合蛋白在体外具有抑制HepG2.2.2.15细胞分泌HBsAg及HBeAg作用。
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| 关 键 词： | 白细胞介素29(IL-29) 克隆 表达 抗乙肝病毒活性 |
| 文章编号： | 1000-484X（2007）05-0411-04 |
| 修稿时间： | 2005-06-252006-01-11 |
Expression of IL-29 cDNA in cos-7 cells and its anti-HBV activity in vitro |
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| CHEN Bing,LUO Xin,LU Yun-Xia,XU Cong-Zhen,ZHANG Sheng-Quan.Expression of IL-29 cDNA in cos-7 cells and its anti-HBV activity in vitro[J].Chinese Journal of Immunology,2007,23(5):411-414. |
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| Authors: | CHEN Bing LUO Xin LU Yun-Xia XU Cong-Zhen ZHANG Sheng-Quan |
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| Institution: | Department of Biochemistry and Molecular Biology, Anhui Medical University, Hefei 230032, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interleukin-29(IL-29) Cloning Expression Anti-HBV activity |
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