创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法的验证与应用

目的建立与验证创伤弧菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型方法。方法以分子分型监测网络脉冲网(Pulse Net)中公布的霍乱弧菌的PFGE标准方法为基础,选用限制性内切酶NotⅠ和SfiⅠ对36株不同来源的创伤弧菌分离株进行PFGE分型。结果 36株创伤弧菌菌株重复经2种酶切电泳后得到的条带均在25条~30条。有3株菌PFGE电泳条带出现降解,其余33株菌经NotⅠ酶切后,形成32种PFGE型别,图谱相似性为45%~100%,分辨力D值为0.998。33株菌经SfiⅠ酶切后可被完全分型,图谱相似性为50.9%~96.3%,D值为1。结论 PFGE作为一种分辨力高、重复性好的分子分型方法,对创伤弧菌进行PFGE分子分型,优先采用SfiⅠ酶切方法,NotⅠ可以为备选酶,同时结合分离菌株的相关流行病学信息,可作为研究创伤弧菌感染与传播的有力工具。