高效液相色谱-串联质谱联用法测定人血清中去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血清中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及5-羟色胺(5-HT)含量的检测方法。方法血清样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(75∶25∶0.1,V/V)为流动相,尼莫地平为内标,通过ZORBAX Extend C18柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)进行分离。采用HPLCMS/MS法,以选择离子监测(SIM)方式进行检测。结果 NE、DA、5-HT的浓度分别为0.5 ng/ml~400 ng/ml、1 ng/ml~100 ng/ml、1 ng/ml~100 ng/ml时,线性关系良好(r0.99),最低定量限分别为0.5 ng/ml、1 ng/ml、1 ng/ml,相对标准偏差(RSD)分别为11.5%、6.1%、9.3%(n=5),平均回收率分别为85.07%,89.2%、90.67%。基质效应、日内、日间精密度和准确度均符合生物样品的测定要求。结论本法操作简便、准确、灵敏度高,适用于血清中神经递质的测定和研究。