人CIDE-3基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达 |
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摘 要: | 目的:构建人CIDE-3基因的原核表达载体,并在E.coli BL21(DE3)中表达.方法:提取人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞的总RNA,经RT—PCR扩增人CIDE-3基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a(+)-CIDE-3.经限制性内切酶Bam H I、Xho I双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白.
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关 键 词: | 基因原核表达载体 融合蛋白 BL21(DE3) E.coli HepG2细胞 初步 限制性内切酶 PCR扩增 总RNA 瘤细胞系 |
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