塞拉菌素促进人结肠癌细胞自噬体积累抑制其增殖的研究

目的 研究塞拉菌素(Sela)对人结肠癌细胞SW480自噬的影响及蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测Sela对SW480细胞的半抑制浓度IC₅₀；克隆形成方法检测Sela对SW480细胞的长期增殖能力抑制作用；Sela与不同死亡抑制剂、自噬抑制剂联合处理作用于SW480细胞，MTT法检测Sela对SW480细胞活力的影响；pEGFP-LC3质粒及pmCherry-EGFP-LC3串联质粒转染SW480细胞，荧光显微镜观察检测Sela诱导下自噬体和自噬溶酶体的形成情况；蛋白质印迹技术测定自噬相关蛋白LC3、p62以及Akt/mTOR通路相关蛋白的表达情况。结果 与对照组相比，Sela处理后SW480细胞活力明显下降，且呈浓度依赖性，IC₅₀为18.3μmol/L；克隆形成实验结果表明，与对照组相比，Sela处理对SW480细胞增殖具有长效抑制作用，差异有统计学意义(P<0.001)；随着Sela作用浓度的升高，SW480细胞内的LC3-Ⅱ和p62含...