地黄单体梓醇促成骨细胞分化的活性研究

目的检测并探索梓醇影响小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1增殖及成骨分化的有效浓度。方法 CCK8法检测不同时间点(1,3,6 d)梓醇在不同浓度下对MC3T3-E1细胞安全性和增殖的影响;实时荧光定量PCR检测成骨分化关键性基因Runx2,Bglap和Col1α1 mRNA的表达水平;不同时间点(4,8 d)给予不同浓度梓醇后氨基安替吡啉测酚法分析细胞上清中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的变化,茜素红染色法(alizarin red staining,ARS)检测细胞矿化水平的变化。结果不同浓度的梓醇都没有促进MC3T3-E1细胞的增殖,即使达到4000 mg·L^-1也不会导致细胞死亡;500 mg·L^-1的梓醇浓度能够显著提高细胞ALP活性,促进细胞矿化,提高成骨分化标志性基因的表达水平。结论梓醇具有促小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1成骨分化和矿化的作用,且对细胞具有较宽的安全浓度范围。