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肝纤维化相关基因C16orf54的克隆及表达
引用本文:周威,杜雅菊,吕志武,肖凡,李学永,魏红莲,成军,魏红山. 肝纤维化相关基因C16orf54的克隆及表达[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2011, 20(4): 316-319
作者姓名:周威  杜雅菊  吕志武  肖凡  李学永  魏红莲  成军  魏红山
作者单位:1. 首都医科大学传染病研究所,首都医科大学附属北京地坛医院,北京,100015;哈尔滨医科大学附属二院消化科
2. 哈尔滨医科大学附属二院消化科
3. 首都医科大学传染病研究所,首都医科大学附属北京地坛医院,北京,100015
4. 首都医科大学附属北京同仁医院
摘    要:目的制备人类功能未知基因C16orf54重组蛋白的多克隆抗体,为该基因功能研究奠定基础。方法分离纯化LX2细胞的总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增C16orf54基因的目的片段,构建重组蛋白表达质粒,转化大肠杆菌BL21,制备C16orf54重组蛋白。鉴定表达正确后,利用纯化的C16orf54重组蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗C16orf54重组蛋白的多克隆抗体。利用制备的多克隆抗体,采用免疫组织化学技术观察该蛋白在肝细胞内的表达特征。结果 Western blot及生物质谱技术分析证实,重组蛋白表达正确。所制备的多克隆抗体效价〉1:320 000,Western blot分析显示,多克隆抗体的特异性良好。免疫组织化学分析显示,该蛋白主要表达于肝实质细胞周围,呈膜型和浆型分布;胃黏膜下组织细胞弱表达。结论 C16orf54多克隆抗体被成功制备。C16orf54主要表达于肝实质细胞周围及胃黏膜下基底层细胞。

关 键 词:肝纤维化  C16orf54  克隆  多克隆抗体

Cloning and expression of fibrosis related gene C16orf54 in liver tissue
ZHOU Wei,DU Yaju,LV Zhiwu,XIAO Fan,LI Xueyong,WEI Honglian,CHENG Jun,WEI Hongshan. Cloning and expression of fibrosis related gene C16orf54 in liver tissue[J]. Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 2011, 20(4): 316-319
Authors:ZHOU Wei  DU Yaju  LV Zhiwu  XIAO Fan  LI Xueyong  WEI Honglian  CHENG Jun  WEI Hongshan
Affiliation:ZHOU Wei1,2,DU Yaju2,LV Zhiwu2,XIAO Fan1,LI Xueyong1,WEI Honglian3,CHENG Jun1,WEI Hongshan11.Beijing Ditan Hospital,Capital Medical University,Beijing 100015,2.The Second Affiliated Hospital,Harbin Medical University,3.Beijing Tongren Hospital,China
Abstract:
Keywords:C16orf54
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