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贝氏柯克斯体34×103重组外膜蛋白的免疫保护性
引用本文:魏文进,温博海,邱玲,牛东升,陈梅玲,高宁.贝氏柯克斯体34×103重组外膜蛋白的免疫保护性[J].军事医学科学院院刊,2004,28(4):337-340.
作者姓名:魏文进  温博海  邱玲  牛东升  陈梅玲  高宁
作者单位:军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30271214)
摘    要:目的原核细胞表达贝氏柯克斯体34×103外膜蛋白基因,评价34×103重组外膜蛋白的免疫保护性.方法用PCR从我国贝氏柯克斯体分离株的基因组中扩增34×103外膜蛋白基因,用该基因与原核表达质粒重组,构建重组表达质粒;用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌细胞内表达重组蛋白.用重组蛋白皮下接种免疫BALB/c小鼠2次,在加强免疫后的第28天,用ELISA法检测小鼠的血清特异性抗体水平以及作体外脾淋巴细胞增殖试验检查小鼠的特异性细胞免疫水平;用10 ID50贝氏柯克斯体腹腔注射攻击免疫小鼠,攻击后第7天病理学检查小鼠脏器的组织病变和染色镜检脾脏的贝氏柯克斯体.结果SDS-PAGE和免疫印迹分析证明重组质粒转化的大肠杆菌产生了34×103重组蛋白,重组蛋白能与贝氏柯克斯体感染小鼠血清发生特异性反应.ELISA法检测出免疫小鼠血清中有高滴度的抗重组蛋白抗体,免疫小鼠的体外淋巴细胞增殖水平显著高于非免疫小鼠.组织病理学检查发现免疫小鼠的肺、肝、脾无明显病变,仅个别小鼠脾脏存在少量柯克斯体,而非免疫小鼠的肺、肝、脾病变十分明显,脾脏肿大并含有大量的柯克斯体.结论重组34×103外膜蛋白具有的免疫保护性,能够诱导机体产生有效的抗贝氏柯克斯体的体液和细胞免疫应答.

关 键 词:贝氏柯克斯体  外膜蛋白  基因表达  重组蛋白  免疫保护性
文章编号:1000-5501(2004)04-0337-05
修稿时间:2003年8月22日

Immunoprotective effect of 34×103 recombinant outer membrane protein of Coxiella burnetii
WEI Wen-Jin,WEN Bo-Hai,QIU Ling,NIU Dong-Sheng,CHENG Mei-Ling,GAO Ning.Immunoprotective effect of 34×103 recombinant outer membrane protein of Coxiella burnetii[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2004,28(4):337-340.
Authors:WEI Wen-Jin  WEN Bo-Hai  QIU Ling  NIU Dong-Sheng  CHENG Mei-Ling  GAO Ning
Institution:WEI Wen-Jin,WEN Bo-Hai*,QIU Ling,NIU Dong-Sheng,CHENG Mei-Ling,GAO Ning
Abstract:
Keywords:Coxiella burnetii  outer membrane protein  gene expression  recombinant protein  immunoprotection
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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