| 利用FRET技术实时检测Bid蛋白在TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中的作用 |
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| 作者姓名： | 张岚 朱德斌 |
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| 作者单位： | 1. 广州医学院医学遗传学与细胞生物学教研室,广州,510182
2. 华南师范大学生物光子学研究院激光生命科学教育部重点实验室,广州,510613 |
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| 基金项目： | 国家青年自然科学基金，广东省自然科学基金博士启动项目，广东高校优秀青年创新人才培养计划项目，教育部科学技术研究重点项目，广州市科技和信息化局应用基础研究计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 在活细胞中实时检测TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中Bid蛋白的作用并探讨PC12细胞凋亡的信号通路.方法 利用基于荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)原理设计的荧光探针pFRET-Bid( YFP-Bid-CFP)转染PC12细胞后,在激光共聚焦显微镜下实时检测Bid蛋白的切割情况,并采用专用软件进行数据分析.结果 TNF-α诱导细胞凋亡的过程中,在短时间内(3 h)就凋亡的细胞中观测不到bid的切割,而在8h后凋亡的细胞中却观测到了hid的切割.结论 通过分析实验结果推测不同时间凋亡的细胞经过的信号通路是不同的,一个是不通过线粒体的较快途径,一个是需要通过线粒体的较慢途径.
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| 关 键 词： | TNF-α FRET Bid蛋白 |
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