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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究
引用本文:何冬雷,谢小明,刘玉,夏立平,许荣华. 结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究[J]. 中国现代医学杂志, 2013, 23(18)
作者姓名:何冬雷  谢小明  刘玉  夏立平  许荣华
作者单位:海南医学院附属医院胃肠肿瘤外科,海南海口,570102
摘    要:目的 建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA.方法 采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08.microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调;实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7fmir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异.结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础.

关 键 词:结肠癌  耐药相关microRNA  5-氟尿嘧啶  LoVo/5-FU细胞株  microRNA芯片

Preliminary study of microRNA expression in colon cancer drug-resistant cell line LoVo/5-Fu
Abstract:
Keywords:colon cancer  drug-resistance related microRNA  5-FU  LoVo/5-FU cell line  microRNA chip
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