| 人酪氨酸羟化酶和神经营养因子双转基因工程细胞对原代多巴胺能神经元的保护作用 |
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| 引用本文： | 张文华,王晓民,吴承远.人酪氨酸羟化酶和神经营养因子双转基因工程细胞对原代多巴胺能神经元的保护作用[J].中华老年医学杂志,2005,24(3):209-212. |
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| 作者姓名： | 张文华 王晓民 吴承远 |
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| 作者单位： | 1. 250012,济南市,山东大学齐鲁医院神经外科
2. 北京大学神经科学研究所 |
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| 摘 要： | 目的 将人的酪氨酸羟化酶(hTH)和胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)基因共同转染SH SY5Y细胞,筛选可同时高效稳定表达 TH和 GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。 方法 将 hTH和 hGDNF cDNA插入表达载体 pcDNA3 .0 和 pcDNA3 .1,构建重组真核表达载体 pcDNA3 1/hGDNF和 pcDNA3 0/hTH,然后转染至 SH SY5Y细胞系,利用RT PCR鉴定和筛选出高效稳定表达阳性克隆。将此工程细胞与大鼠原代多巴胺能神经元共培养,免疫细胞化学检测观察多巴脂能神经元的数目和生长状态。 结果 (1)双转基因工程细胞可防止多巴脂能神经元退变死亡,与对照组比较,神经元数目最多提高了 2 8 倍(P<0 .01);(2)工程细胞可抵抗N 甲基 苯基吡啶(MPP+)对多巴脂能神经元的毒性损伤作用,与对照组比较,细胞数目增加了83 .6%(为7 6倍,P<0. 01)。 结论 首次成功建立了可同时高效稳定表达人 TH和 GDNF双基因的工程细胞,对多巴脂能神经元有防、治兼顾的保护作用。
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| 关 键 词： | GDNF 多巴胺能神经元 酪氨酸羟化酶 保护作用 稳定表达 对照组 工程细胞 SH-SY5Y细胞 阳性克隆 pcDNA3 |
| 修稿时间： | 2004年3月23日 |
Protective effect of both human TH and GDNF cDNA-engineered SH-SY5Y cells on primary dopaminergic neurons |
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| ZHANG Wen-hua,WANG Xiao-min,WU Cheng-yuan.Protective effect of both human TH and GDNF cDNA-engineered SH-SY5Y cells on primary dopaminergic neurons[J].Chinese Journal of Geriatrics,2005,24(3):209-212. |
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| Authors: | ZHANG Wen-hua WANG Xiao-min WU Cheng-yuan |
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