荧光定量PCR鉴别检测U·Urealyticum和U·Parvum方法的建立

目的：建立定量检测U.Urealyticum（UU）、U.Parvum（UP）的灵敏、特异的荧光定量PCR方法。方法：选择UU和UP的尿素酶基因设计两对引物和对应的探针组建2个TaqMan PCR反应体系,应用克隆的质粒建立系列标准品,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和特异性分析。结果：UU和UP两标准曲线具有良好的线性关系,相关系数分别为0.9895和0.9956,无非特异性扩增。结论：应用实时TaqMan PCR法定量检测UU、UP,具有快速、特异、灵敏、便捷的特点,为解脲脲原体感染的流行病学和病理机制的研究奠定了基础。