| pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系HepG2中的表达 |
| |
| 引用本文： | 翟嵩,孙明珠,王文俊,李亚萍,张欣,李梅,党双锁.pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系HepG2中的表达[J].肝脏,2016(1):34-38. |
| |
| 作者姓名： | 翟嵩 孙明珠 王文俊 李亚萍 张欣 李梅 党双锁 |
| |
| 作者单位： | 710004,西安交通大学医学院第二附属医院感染科 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81170393) |
| |
| 摘 要： | 目的构建pEGFP-prohibitin真核表达质粒,并鉴定其在pEGFP-prohibitin转染的人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法采用高保真PCR扩增获得prohibitin的全长编码序列,构建真核表达载体pEGFP-prohibitin,并通过基因测序和BLAST比对鉴定重组质粒;提取pEGFP-prohibitin和pEGFP-N1质粒,并通过TurboFect转染试剂转染HepG2细胞;采用实时PCR和Western印迹方法分别在mRNA水平和蛋白质水平检测prohibitin蛋白在转染后HepG2细胞中的表达。结果成功构建pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒,并将其成功转染HepG2细胞;pEGFP-prohibitin转染组细胞prohibitin的表达量比空载转染组和未转染组细胞明显增加。结论成功构建真核表达载体pEGFP-prohibitin,并证明抗增殖蛋白prohibitin在pEGFP-prohibitin转染人肝癌细胞系HepG2中高表达。
|
| 关 键 词： | prohibitin蛋白 基因表达 重组质粒 转染 |
Establishment and expression of recombinant pEGFP-prohibitin plasmid in HepG2 cell line |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Prohibitin Gene expression Recombinant plasmid Transfection |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
