| 人p65和IκBα基因真核表达载体的构建及在永生化滑膜细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 程欣,王立峰,张健,刘娜,苏金,于江天,刘新平.人p65和IκBα基因真核表达载体的构建及在永生化滑膜细胞中的表达[J].第四军医大学学报,2006,27(19):1729-1732. |
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| 作者姓名： | 程欣 王立峰 张健 刘娜 苏金 于江天 刘新平 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究和开发计划（2002CB513007）;国家自然科学基金（30300319） |
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| 摘 要： | 目的：构建人p65和IκBα基因的真核表达载体并检测其在人永生化滑膜细胞MH7a中的毒达．方法：应用RT—PCR方法从体外培养的HEK293细胞mRNA中扩增出p65和IκBα基因的编码区。克隆至pMD18T载体并测序，然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3．1myc／His（-）A，酶切鉴定正确后以脂质体法瞬时转染MH7a细胞，Western Blot检测p65和IκBα的表达．结果：测序证实PCR扩增得到的p65和IκBα基因编码区序列正确；脂质体法转染MH7a细胞后检测到预期目的蛋白的表达．结论：成功构建了p65和IκBα的真核表达载体并使其在人永生化滑膜细胞中表达．
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| 关 键 词： | NF-κB p65 IκBα 类风湿性关节炎 逆转录聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1000-2790(2006)19-1729-04 |
| 收稿时间： | 05 8 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 05 18 2006 12:00AM |
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