硼替佐米通过下调Smurf1拮抗大鼠慢性移植肾间质纤维化

目的：通过观察硼替佐米（bortezomib）对于smad泛素化调节因子1（Smurf1）的表达及肾小管上皮细胞?间充质转分化（epithelial?mesenchymal transition，EMT）的影响，探讨硼替佐米抗移植肾纤维化的分子机制。方法：构建大鼠移植肾间质纤维化模型，并用硼替佐米进行干预。通过马松三色（Masson）染色观察硼替佐米对各组大鼠移植肾纤维化程度的影响。通过免疫组化检测硼替佐米对于肿瘤坏死因子?α（TNF?α）、Smurf1、上皮细胞钙黏蛋白（E?cadherin）及α?平滑肌蛋白（α?SMA）表达的影响。以肾小管上皮细胞（HK?2）为对象，以TNF?α作为刺激因子，通过Western blot检测Smurf1、E?cadherin和α?SMA的表达变化。通过慢病毒转染的方式敲低Smurf1在HK?2细胞中的表达，通过Western blot检测TNF?α刺激后E?cadherin和α?SMA的表达变化。将细胞分为对照组、TNF?α组、硼替佐米组及实验组，Western blot检测Smurf1、E?cadherin和α?SMA的表达变化。结果：硼替佐米治疗组大鼠移植肾间质纤维化明显且α?SMA与Smurf1的表达显著低于生理盐水治疗组（P < 0.05），同时E?cadherin的表达显著高于生理盐水治疗组（P < 0.05）。50 ng/mL TNF?α刺激HK?2细胞24 h后Smurf1和α?SMA的表达明显高于0 h组（P < 0.05），E?cadherin的表达则明显低于0 h组（P < 0.05）。 敲低Smurf1的表达后，sh?Smurf1组细胞在TNF?α刺激后的E?cadherin表达明显高于sh?con组细胞（P < 0.05），而α?SMA则明显降低（P < 0.05）。硼替佐米干预后，实验组细胞的E?cadherin的表达明显高于TNF?α组（P < 0.05），α?SMA的表达则明显低于TNF?α组（P < 0.05）。结论：硼替佐米可以通过抑制Smurf1的表达从而抑制TNF?α诱导的肾小管上皮细胞EMT现象，进而抑制移植肾间质纤维化。

Bortezomib attenuates the renal interstitial fibrosis in rat kidney transplantation via downregulating the expression of Smurf1