聚山梨酯80对多源肥大细胞脱颗粒的影响研究

目的 通过比较不同浓度聚山梨酯80溶液对RBL-2H3、P815、Ku812细胞脱颗粒的影响，探究聚山梨酯80的量与过敏反应的关系，进而筛选出一套灵敏、稳定的体外肥大细胞脱颗粒模型。方法 体外培养RBL-2H3、P815和Ku812细胞，测定3株细胞的生长曲线，在细胞生长对数期，以不同浓度（0.04、0.20、1.00、5.00、10.00、20.00、40.00、80.00 mg/mL）聚山梨酯80分别刺激3株细胞，采用中性红染色法显微镜下观察不同浓度聚山梨酯80溶液对3株细胞脱颗粒的影响，并计算脱颗粒百分率，同时以化学发光法分别检测组胺和β-氨基己糖苷酶释放率，以酶联免疫吸附法测定类胰蛋白酶的释放量；并进一步检测聚山梨酯80对人的肥大细胞IgE释放的影响。结果 3株肥大细胞脱颗粒模型中，各细胞的脱颗粒指标均随聚山梨酯80浓度的升高而升高。相同浓度聚山梨酯80对人源、大鼠、小鼠肥大细胞的类胰蛋白酶释放量无较大统计学差异；与RBL-2H3细胞系比较，P815细胞和组胺释放率显著降低（P<0.05、0.01），Ku812细胞组胺释放率和β-氨基己糖苷酶释放率显著升高（P<0.05、0.01），Ku812细胞脱颗粒最灵敏。但在实验过程中发现Ku812细胞模型稳定性、可重复性较差，而RBL-2H3细胞稳定性、可重复性均优于Ku812和P815细胞。0.04~80.00 mg/mL的聚山梨酯80溶液作用于Ku812细胞产生的IgE均低于检测限。结论 聚山梨酯80诱导的过敏反应可能是不经过IgE介导的类过敏反应，随着聚山梨酯80浓度的增大，3个细胞模型脱颗粒现象显著，相比于Ku812和P815细胞，RBL-2H3细胞更适合作为体外肥大细胞脱颗粒检测模型。

Effect of Tween 80 on degranulation of mast cells