干扰ANXA3基因表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘 要：［目的］ 探究干扰膜联蛋白A3（ANXA3）基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响以及可能作用机制。［方法］ 以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象，RNA干扰技术沉默ANXA3基因表达，荧光定量RT-PCR和Western Blot检测转染后细胞中ANXA3 mRNA及蛋白表达；四甲基偶氮唑（MTT）法检测细胞的增殖能力变化，膜联蛋白 V-FITC（Annexin V-FITC）/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞的凋亡率，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）蛋白的水平。［结果］ 空白对照组、阴性对照组和ANXA3干扰组细胞中ANXA3 mRNA的表达量分别为0.078±0.006、0.072±0.007和0.008±0.001；ANXA3蛋白表达量分别为0.792±0.085、0.764±0.078和0.353±0.039；细胞的凋亡率分别为（3.425±0.643）%、（3.537±0.740）%、（23.455±3.686）%；Bcl-2蛋白水平分别为1.256±0.247、1.239±0.265、0.624±0.065；Bax蛋白水平分别为0.856±0.086、0.842±0.079、1.526±0.344；Cleaved Caspase-3蛋白水平分别为0.522±0.057、0.535±0.062、1.230±0.367。与空白对照组相比，ANXA3干扰组细胞中ANXA3 mRNA和蛋白水平显著性降低（P<0.05），细胞的增殖能力显著性降低（P<0.05），其凋亡率显著性增加（P<0.05）；细胞中Bcl-2蛋白水平显著性下调（P<0.05），Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著性上调（P<0.05）。［结论］ 干扰ANXA3表达抑制乳腺癌细胞增殖，诱导其凋亡，其作用与Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平变化引起的细胞凋亡通路的变化有关。

Effect of Interfering ANXA3 Gene Expression on Proliferation and Apoptosis of Breast Cancer Cells