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骨髓间充质干细胞来源的外泌体对骨再生机制研究
引用本文:何伟 陈荣春 曾芳俊 曾文丛. 骨髓间充质干细胞来源的外泌体对骨再生机制研究[J]. 中国骨质疏松杂志, 2019, 0(4): 477-483
作者姓名:何伟 陈荣春 曾芳俊 曾文丛
作者单位:赣州市人民医院, 江西 赣州 341000
摘    要:目的本研究旨在检测骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-Exos)的特征,并通过体内体外实验探讨其对成骨分化的影响及对骨再生的机制。方法①原代培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs),并对其表面抗原和多系分化潜能进行鉴定;②收集BMSC的P4~P6代细胞培养的培养上清液,应用试剂盒提取BMSC-Exos;③透射电镜观察BMSC-Exos的形态结构,免疫电泳检测BMSC-Exos的表面抗原;④茜素红、ALP染色验证BMSC-Exos在体外成骨分化中的作用;⑤通过大鼠颅骨缺损动物模型验证BMSC-Exos在体内骨再生的作用;⑥通过免疫电泳和qRT-PCR检测加入BMSC-Exos后的成骨细胞中相关蛋白和基因的表达情况。结果①分离培养的BMSCs形态呈多角形或长梭形,表面抗原CD90、CD29、CD44为阳性,符合间充质干细胞的特征;②BMSC-Exos呈双面凹的圆形或椭圆形,直径约40~120 nm(81.7±19.9),表面抗原与BMSC一致;③经茜素红染色和ALP染色后,染色强度与Exo浓度呈正相关;④通过对大鼠颅骨缺损模型拍摄X片、组织学分析,外泌体可促进大鼠颅骨缺损的修复和新生骨的形成;⑤免疫电泳显示经外泌体处理后,BMSC中的OCN、Runx2、β-catenin蛋白含量增加,qRT-PCR结果显示Runx2、β-catenin的基因表达上调。结论 BMSC-Exos有促进骨再生的能力,并与上调Wnt/β-catenin通路有关。

关 键 词:外泌体   骨髓间充质干细胞   成骨分化   骨再生

The mechanism of bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomes for bone regeneration
HE Wei,CHEN Rongchun,ZENG Fangjun,ZENG Wencong. The mechanism of bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomes for bone regeneration[J]. Chinese Journal of Osteoporosis, 2019, 0(4): 477-483
Authors:HE Wei  CHEN Rongchun  ZENG Fangjun  ZENG Wencong
Affiliation:Department of Spinal surgery, Ganzhou People''s Hospital, Ganzhou 341000, China
Abstract:
Keywords:exosomes   bone marrow mesenchymal stem cells   osteogenic differentiation   bone regeneration
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