桦木酸通过抑制STAT3 的活化提高胰腺癌细胞对吉非替尼的敏感性

摘要] 目的：探讨桦木酸（BEA）提高胰腺癌Panc-1、Miapaca-2 细胞对吉非替尼的敏感性及其潜在的作用机制。方法：细胞培养完成后，将对吉非替尼不敏感的Panc-1、Miapaca-2 细胞随机分为4 组：对照组、BEA组、吉非替尼组及BEA联合吉非替尼组，分别予以不处理、BEA、吉非替尼及BEA联合吉非替尼处理。MTS法检测BEA对2 种细胞的增敏效果，集落形成实验检测BEA协同吉非替尼的治疗效果，WB实验检测BEA对Panc-1 细胞凋亡相关蛋白的影响，流式细胞术检测BEA对Panc-1 细胞凋亡的影响，表面等离子体共振（SPR）实验验证信号转导子和转录激活子3（STAT3）和BEA的直接结合，分子对接和分子动力学模拟实验预测STAT3 和BEA的结合模式。结果：BEA协同增强Panc-1、Miapaca-2 细胞对吉非替尼的敏感性（P<0.05），使其对两种细胞的IC50值均降低至原值的50%以下。吉非替尼联合BEA较单用吉非替尼或BEA促进Panc-1 细胞的凋亡以及凋亡相关蛋白cleaved-PARP和Bax 的表达，减少对凋亡抑制蛋白Bcl-2 的表达（均P<0.05 或P<0.01）。BEA对Panc-1 细胞中STAT3 的活化有剂量依赖性抑制作用（P<0.01）。BEA通过与STAT3 的Lys-591、Ser-613 形成氢键而稳定BEA与STAT3 的结合作用，同时BEA稳定在STAT3 的蛋白结合位点内，以此阻断STAT3 二聚发挥增敏作用。结论：联用BEA和吉非替尼显著抑制胰腺癌Panc-1、Miapaca-2 细胞的增殖并促进其凋亡，这种增敏作用可能是由BEA对STAT3 抑制作用所介导。

Betulinic acid enhances gefitinib-sensitivity of pancreatic cancer cells via inhibition of STAT3 activation