| 二甲双胍通过激活自噬促进MC3T3-E1细胞系成骨分化的研究 |
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| 引用本文： | 徐庆,陈旭,张彦超,何敬腾,李建军.二甲双胍通过激活自噬促进MC3T3-E1细胞系成骨分化的研究[J].现代药物与临床,2019,34(3):583-590. |
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| 作者姓名： | 徐庆 陈旭 张彦超 何敬腾 李建军 |
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| 作者单位： | 中国医科大学附属盛京医院创伤骨科,辽宁沈阳,110004;中国医科大学附属盛京医院创伤骨科,辽宁沈阳,110004;中国医科大学附属盛京医院创伤骨科,辽宁沈阳,110004;中国医科大学附属盛京医院创伤骨科,辽宁沈阳,110004;中国医科大学附属盛京医院创伤骨科,辽宁沈阳,110004 |
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| 基金项目： | 辽宁省自然科学基金资助项目（201602836） |
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| 摘 要： | 目的探讨二甲双胍通过激活自噬促进MC3T3-E1细胞系成骨分化的作用。方法用含有不同浓度二甲双胍的成骨诱导剂处理MC3T3-E1细胞,其中二甲双胍的浓度分别为0(对照)、200、400、800μmol/L。利用碱性磷酸酶(ALP)染色检测二甲双胍促进MC3T3-E1细胞成骨的最适浓度,采用免疫印迹法(Western blotting)和免疫荧光法检测自噬相关蛋白,并选择出二甲双胍的最佳干预浓度。对照组、二甲双胍400μmol/L组、二甲双胍400μmol/L+3-甲基腺嘌呤(3-MA,5 mmol/L)组和3-MA 5 mmol/L组分别干预MC3T3-E1细胞4 h后,采用Western blotting法、免疫荧光法、透射电镜检测自噬指标,并利用ALP染色、半定量RT-PCR和Western blotting检测成骨能力。结果二甲双胍能够剂量相关性地促进MC3T3-E1细胞的ALP活性,并且400μmol/L二甲双胍是促进MC3T3-E1细胞成骨的最适浓度。二甲双胍0(对照)、200、400μmol/L组的LC3 Ⅱ/Ⅰ比值逐渐增大,P62/β-actin比值逐渐减小,LC3荧光强度逐渐增强;800μmol/L二甲双胍组的LC3 Ⅱ/Ⅰ值减小,P62/β-actin比例增大,LC3荧光强度下降;且与对照组比较,400μmol/L二甲双胍组的LC3Ⅱ/Ⅰ比值明显增大,P62/β-actin比值明显降低(P0.05),LC3荧光强度最强。与对照组比较,二甲双胍400μmol/L组中LC3 Ⅱ/Ⅰ的比值增大,P62蛋白表达减少(P0.05),LC3荧光强度增强,自噬体数量增多;ALP活性增强,成骨相关基因和蛋白OCN,COL1的表达增强(P0.001、0.05、0.01)。二甲双胍中加入3-MA 5 mmol/L后,LC3 Ⅱ/Ⅰ的比值减小,P62蛋白表达增多,LC3荧光强度减弱,自噬体数量减少;ALP活性减弱,成骨相关基因和蛋白OCN,COL1的表达减弱。结论二甲双胍能通过激活MC3T3-E1细胞系的适度自噬促进其成骨分化。
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| 关 键 词： | 二甲双胍 自噬 MC3T3-E1细胞 成骨分化 |
| 收稿时间： | 2018/10/28 0:00:00 |
Research on metformin promotes osteoblastic differentiation of MC3T3-E1 cells by activating autophagy |
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| XU Qing,CHEN Xu,ZHANG Yan-chao,HE Jing-teng and LI Jian-jun.Research on metformin promotes osteoblastic differentiation of MC3T3-E1 cells by activating autophagy[J].Drugs & Clinic,2019,34(3):583-590. |
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| Authors: | XU Qing CHEN Xu ZHANG Yan-chao HE Jing-teng and LI Jian-jun |
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| Institution: | Department of Trauma Orthopaedics, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, China,Department of Trauma Orthopaedics, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, China,Department of Trauma Orthopaedics, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, China,Department of Trauma Orthopaedics, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, China and Department of Trauma Orthopaedics, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | metformin autophagy MC3T3-E1 cell osteogenic differentiation |
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