| 体外扩增的NK细胞运载溶瘤呼肠孤病毒对结直肠癌细胞的杀伤效应 |
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| 引用本文： | 陈晓庆,王念雪,龙世棋,廖春香,刘金河,杨薇,赵星. 体外扩增的NK细胞运载溶瘤呼肠孤病毒对结直肠癌细胞的杀伤效应[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2019, 26(5): 492-499 |
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| 作者姓名： | 陈晓庆 王念雪 龙世棋 廖春香 刘金河 杨薇 赵星 |
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| 作者单位： | 1. 贵州医科大学 组织工程与干细胞实验中心，贵州贵阳550004；2. 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室，贵州贵阳550004；3. 贵州医科大学免疫学教研室，贵州贵阳550025；4. 贵州医科大学肿瘤学教研室，贵州贵阳550004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No. 81860542）；中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助（No.2017PT31042）; 贵州省普通高等学校科技拔尖人才支持计划（黔教合KY字[2018]049）；贵州省应用基础研究计划重大专项（黔科合J 重大字[2015]2003）；贵州省科技厅社会发展攻关项目（黔科合SY字[2013]3010 号） |
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| 摘 要： | [摘要] 目的：评价体外扩增的人NK细胞能否作为呼肠孤病毒的运载细胞并探讨其临床转化应用价值。方法：体外扩增人NK细胞，用NK细胞装载呼肠孤病毒，激光共聚焦显微镜观察呼肠孤病毒与NK细胞结合的部位。NK细胞运载呼肠孤病毒（Reo-NK）到达肿瘤细胞后，CCK-8 法检测在中和抗体的存在下病毒发挥的溶瘤作用；qPCR法检测肿瘤细胞内病毒RNA的相对表达量。CCK-8 法检测Reo-NK对结直肠癌KRAS基因突变型（DLD-1）和野生型（CaCo-2、HT29）细胞株的杀伤效应，ELISA 双抗体夹心法检测NK细胞释放的穿孔素水平。结果：呼肠孤病毒主要结合于NK细胞膜上，在人AB型血清的存在下体外扩增的NK细胞可将呼肠孤病毒传递到肿瘤细胞，且传递后的呼肠孤病毒仍具有显著溶瘤活性（P<0.01）；同时检测到肿瘤细胞内病毒RNA的表达量显著增高（P<0.01）。与NK组相比，Reo-NK组对KRAS基因突变型和野生型结直肠癌细胞株的细胞毒作用均显著增强（P<0.05），穿孔素的释放均明显增加（P<0.05）。结论：体外扩增的人NK细胞适合作为呼肠孤病毒的运载细胞，且呼肠孤病毒能够增强NK细胞的细胞毒作用，两者联合后对结直肠癌细胞可发挥更强的杀伤作用，因而具有重要的临床转化应用价值。
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| 关 键 词： | 呼肠孤病毒；自然杀伤细胞；运载细胞；结直肠癌细胞 |
| 收稿时间： | 2019-01-19 |
| 修稿时间： | 2019-03-20 |
Cytotoxic effect of in vitro expanded NK cell-carrying oncolytic reovirus on colorectal cancer cells |
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| CHEN Xiaoqing,WANG Nianxue,LONG Shiqi,LIAO Chunxiang,LIU Jinhe,YANG Wei and ZHAO Xing. Cytotoxic effect of in vitro expanded NK cell-carrying oncolytic reovirus on colorectal cancer cells[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2019, 26(5): 492-499 |
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| Authors: | CHEN Xiaoqing WANG Nianxue LONG Shiqi LIAO Chunxiang LIU Jinhe YANG Wei ZHAO Xing |
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| Affiliation: | 1. Center for Tissue Engineering and Stem Cell Research, Guizhou Medical University, Guiyang 550004, Guizhou, China; 2. Key Laboratory of Adult Stem Cell Transformation Research, Chinese Academy of Medical Sciences, Guiyang 550004, Guizhou, China;3. Department of Immunology, Guizhou Medical University, Guiyang 550025, Guizhou, China; 4. Department of Oncology, Guizhou Medical University,Guiyang 550004, Guizhou, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | reovirus natural killer cell carrier cell colorectal cancer cell |
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