| Psalmotoxin⁃1抑制活化的肝星状细胞过程中microRNA差异表达谱的变化分析 |
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| 引用本文： | 童朝刚,朱月琴,王亚男,潘学胜,芮晨辉,黄 艳. Psalmotoxin⁃1抑制活化的肝星状细胞过程中microRNA差异表达谱的变化分析[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2019, 0(4): 513-519 |
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| 作者姓名： | 童朝刚 朱月琴 王亚男 潘学胜 芮晨辉 黄 艳 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学附属巢湖医院普外科，安徽 合肥 238000,安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032,安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032,安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032,安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032,安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金杰青项目（1908085J30）；安徽省高校自然科学研究项目（KJ2017A192）；安徽省学术技术带头人后备人选科研活动经费资助项目（2015H040）；高校优秀青年人才支持计划重点项目（gxyqZD2016049）；安徽医科大学国家级大学生创新创业训练计划项目（201810366060）；安徽医科大学校级青年拔尖人才支持计划（0601037104）；青年英才双培工程（0601037206）；临床医学(“5+3”一体化)专业“早期接触科研”训练计划立项制项目（2017?ZQKY?26） |
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| 摘 要： | 目的：探讨酸敏感离子通道1a（acid?sensing ion channel 1a，ASIC1a）特异性阻断剂狼蛛毒素（psalmotoxin?1，PcTx?1）抑制血小板衍生生长因子BB（platelet derived growth factor?BB，PDGF?BB）活化的肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）过程中微小RNA（microRNA，miRNA）差异表达谱及生物信息学分析。方法：取对数生长期的HSC细胞，分为对照组、模型组和PcTx组。对照组不做处理，模型组加入PDGF?BB（10 ng/mL）培养24 h，PcTx组给予PcTx?1刺激1 h后，再加入PDGF?BB（10 ng/mL）培养24 h。采用RT?PCR和Western blot检测α?平滑肌肌动蛋白（α?smooth muscle actin，α?SMA）、Ⅰ型胶原（collagen?Ⅰ）和ASIC1a的表达，MTT法检测细胞增殖情况，验证HSC细胞是否活化以及PcTx?1是否阻断ASIC1a的表达。提取的总RNA质检合格后进行高通量测序，筛选差异表达的miRNA。通过miRanda算法对差异miRNA进行靶基因预测，并对miRNA靶基因进行功能和代谢通路分析。结果：PcTx?1阻断ASIC1a后，ASIC1a的表达降低，HSC细胞活化的标志性基因α?SMA和collagen?Ⅰ的表达明显减少，提示PcTx?1可阻断PDGF诱导的HSC活化。与对照组比较，模型组miRNA表达谱中差异表达miRNA共有38个，其中上调6个，下调32个（P < 0.05）。与模型组比较，PcTx组miRNA表达谱中差异表达miRNA共有17个，其中上调1个，下调16个（P < 0.05）。结论：高通量筛选得到的PcTx?1抑制PDGF?BB活化HSC过程中miRNA差异表达谱，为肝纤维化的发病机制研究提供了新的靶点和思路。
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| 关 键 词： | 血小板衍生生长因子BB；微小RNA；肝星状细胞；高通量测序 |
| 收稿时间： | 2018-10-16 |
| 修稿时间： | 2019-03-01 |
Changes in differential expression profiles of microRNAs during the inhibition of activated hepatic stellate cells by Psalmotoxin-1 |
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| Tong Chaogang,Zhu Yueqin,Wang Yanan,Pan Xuesheng,Rui Chenhui and Huang Yan. Changes in differential expression profiles of microRNAs during the inhibition of activated hepatic stellate cells by Psalmotoxin-1[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2019, 0(4): 513-519 |
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| Authors: | Tong Chaogang Zhu Yueqin Wang Yanan Pan Xuesheng Rui Chenhui Huang Yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Platelet-derived growth factor-BB microRNA hepatic stellate cells high-throughput sequencing |
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