| FTO对小鼠肾小球系膜细胞m6A修饰及增殖能力的影响 |
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| 引用本文： | 陈天宇,陈 欣,张恒璐,李 婉,陆卫平.FTO对小鼠肾小球系膜细胞m6A修饰及增殖能力的影响[J].南京医科大学学报,2019(6):851-855. |
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| 作者姓名： | 陈天宇 陈 欣 张恒璐 李 婉 陆卫平 |
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| 作者单位： | 南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,南京医科大学病原生物学系，江苏 南京 211166,南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300 |
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| 基金项目： | 江苏省卫生健康委员会课题（H201458）；淮安市533英才工程科研项目（HAA201744） |
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| 摘 要： | 目的：构建表达脂肪与肥胖相关（fat mass and obesity associated，FTO）基因的重组质粒，并检测其对小鼠肾小球系膜细胞（mice mesangial cell，MMC）N6?甲基腺嘌呤（m6A）修饰及增殖能力的影响。方法：PCR法扩增FTO基因片段，并将其插入表达载体 pCMV?MCS?EGFP质粒中以构建重组质粒pCMV?FTO。将目的质粒pCMV?FTO及对照质粒pCMV分别转染MMC，采用qRT?PCR法检测FTO mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测细胞FTO蛋白和相关增殖标志物的表达，CCK8法检测细胞增殖，m6A RNA甲基化定量试剂盒检测m6A含量。结果：菌落PCR鉴定以及测序结果证实重组质粒pCMV?FTO构建成功。RT?qPCR及蛋白印迹结果显示转染目的质粒pCMV?FTO后FTO表达明显增加。过表达FTO后，m6A含量、细胞增殖水平及细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）蛋白水平均显著下降。结论：FTO可以降低 MMC中m6A修饰水平及抑制细胞增殖。
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| 关 键 词： | 脂肪与肥胖相关基因 小鼠肾小球系膜细胞 m6A 增殖 |
| 收稿时间： | 2019/1/17 0:00:00 |
Effects of FTO on m6A and proliferation of mouse mesangial cells |
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| Chen Tianyu,Chen Xin,Zhang Henglu,Li Wan and Lu Weiping.Effects of FTO on m6A and proliferation of mouse mesangial cells[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2019(6):851-855. |
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| Authors: | Chen Tianyu Chen Xin Zhang Henglu Li Wan and Lu Weiping |
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