| 呼吸道合胞病毒反向遗传系统中辅助质粒的构建 |
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| 引用本文： | 胡兵,方志正. 呼吸道合胞病毒反向遗传系统中辅助质粒的构建[J]. 国际生物制品学杂志, 2013, 36(6): 296-299. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2013.06.005 |
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| 作者姓名： | 胡兵 方志正 |
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| 作者单位： | 430060 武汉生物制品研究所有限责任公司病毒疫苗研究室 |
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| 摘 要： | 目的 构建可用于表达呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）反向遗传操作中所需的4个功能性结构蛋白的辅助质粒。方法 利用RT-PCR扩增RSV Long株的核蛋白（N）、磷蛋白（P）、大蛋白（L）及转录延长/终止抑制因子M2-1基因。将N、P、M2-1基因PCR产物双酶切后连接表达载体pCI；L基因分两段扩增并分别与pMD 19-T simple载体连接，再先后切下与pCI连接。将构建得到的4个辅助质粒测序并转染Vero细胞，通过间接免疫荧光法检测相应蛋白的表达。结果 扩增得到N、P、M2-1和L 4个结构蛋白基因，相应构建的辅助质粒经序列测定，与GenBank公布的RSV Long株序列完全一致；间接免疫荧光法检测表明， N、P、M2-1能在Vero细胞中表达。结论 在分子水平构建了RSV反向遗传学研究中所需的4个辅助质粒，并成功表达出3个结构蛋白。
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| 关 键 词： | 呼吸道合胞病毒 质粒 病毒结构蛋白质类 |
Construction of helper plasmids for reverse genetics system of respiratory syncytial virus |
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| HU Bing,FANG Zhi-zheng. Construction of helper plasmids for reverse genetics system of respiratory syncytial virus[J]. International Journal of Biologicals, 2013, 36(6): 296-299. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2013.06.005 |
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| Authors: | HU Bing FANG Zhi-zheng |
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| Affiliation: | Research Laboratory of Viral Vaccine, Wuhan Institute of Biological Products Co.,Ltd., Wuhan 430060, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Respiratory syncytial virus Plasmids Viral structural proteins |
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