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| 人支气管上皮癌变各阶段组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析 | |
| 引用本文： | 吴晓英,肖志强,陈主初,李萃,李建玲,冯雪萍,易红,梁宋平,陈平. 人支气管上皮癌变各阶段组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析[J]. 中国癌症杂志, 2004, 14(3): 201-206,211 |
| 作者姓名： | 吴晓英 肖志强 陈主初 李萃 李建玲 冯雪萍 易红 梁宋平 陈平 |
| 作者单位： | 1. 中南大学湘雅医院医学实验研究中心,卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078 2. 中南大学湘雅医院医学实验研究中心,卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410008 3. 湖南师范大学生命科学学院,湖南,长沙,410081 |
| 基金项目： | 国家“973”计划 (No .2 0 0 1CB5 10 2 )，国家自然科学基金项目 (No .3 0 0 0 0 0 2 8,3 0 2 40 0 5 6)，教育部跨世纪优秀人才培养计划基金 (教育部科技函 [2 0 0 2 ] 48)，湖南省科技厅重点科研项目 (No .0 2SSY2 0 0 1 1)，湖南省卫生厅重点科研项目 (No .Z0 2 |
| 摘 要： | 目的探讨肺鳞癌癌前病变恶性转化的机制. 方法应用脱氧胆酸-三氯醋酸(deoxycholate-trichloroaetic acid,DOC-TCA)法提纯支气管上皮癌变各阶段组织总蛋白质,采用固相pH梯度(immobilized pH gradient, IPG)双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis, 2-DE)分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,ImageMaster 2D图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图谱(peptide mass fingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点. 结果①重复性检测表明同一例鳞状上皮化生组织的三块凝胶的平均点数为1 216 ±75 ,平均匹配点数为1 082±67,匹配率达89.3% , 且3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在IEF方向的偏差是(0.865±0.247)mm ,在SDS-PAGE方向上的偏差为(0.971±0.104)mm,由此获得了分辨率较高、重复性较好的人支气管上皮癌变各阶段组织的双向凝胶电泳图谱,正常上皮、鳞状化生、不典型增生和上皮浸润癌组织凝胶的平均蛋白质点数依次为1 190±36、1 227±39、1 272±41、1 326±52;②比较分析人支气管正常上皮、鳞状化生、不典型增生和上皮浸润癌组织各7例的双向凝胶电泳图谱,发现癌变前一阶段与后一阶段两两间的差异蛋白点分别为 34±16、41±15、46±13;③对24个差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析,鉴定出一些与细胞增生、分化、细胞周期调控、信号传导等有关的蛋白质. 结论本研究建立了分辨率高、重复性较好的人支气管上皮癌变各阶段组织的双向凝胶电泳图谱,识别并鉴定了一些与支气管上皮癌变相关的差异表达的蛋白质,为进一步探讨肺鳞癌癌变机制,筛选肺鳞癌的特异性分子标志物奠定了初步基础. |
| 关 键 词： | 人支气管上皮 癌前病变 肺鳞癌 双向凝胶电泳 质谱分析 质量 蛋白质组 |
| 文章编号： | 1007-3639(2004)03-0201-06 |
Differential analysis of two-dimension gel electrophoresis profiles from the normal-metaplasia-dysplasia-carcinoma tissue of human bronchial epithelium |
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| Abstract: | |
| Keywords: | human bronchial epithelium pre-neoplastic lesions lung squamous carcinoma 2-DE spectrum analysis mass proteome |
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