| B细胞淋巴瘤因子6高表达对大鼠肝细胞凋亡的抑制作用 |
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| 引用本文： | 潘传涌,杨生生,傅海龙,缪明永,焦炳华. B细胞淋巴瘤因子6高表达对大鼠肝细胞凋亡的抑制作用[J]. 第二军医大学学报, 2012, 33(4): 349-354 |
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| 作者姓名： | 潘传涌 杨生生 傅海龙 缪明永 焦炳华 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433
2. 第二军医大学长征医院麻醉科,上海,200003 |
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| 基金项目： | 上海市科委基础重点项目（10JC1417400） |
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| 摘 要： | [摘要] 目的：克隆大鼠B细胞淋巴瘤因子6（B-cell lymphoma 6 protein，Bcl6）基因，构建绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-Bcl6，初步探讨大鼠Bcl6转录因子在大鼠肝细胞中的生物学作用。方法：首先提取大鼠肝脏总RNA，经反转录和巢式PCR扩增Bcl6编码区的CDS序列后，通过基因重组的方法构建并鉴定pEGFP-Bcl6重组质粒；然后利用脂质体转染法将重组质粒导入大鼠肝细胞BRL-3A中，利用实时定量PCR和蛋白印迹的方法检测其表达；最后应用流式细胞术分析转染融合表达质粒后肝细胞的凋亡及应用MTT法检测肝细胞的增殖情况。结果: 通过PCR法和测序法鉴定重组质粒pEGFP-Bcl6构建成功，通过实时定量PCR法和蛋白印迹法鉴定重组质粒瞬转成功，通过流式细胞术证实Bcl6具有抑制肝细胞凋亡的功能，通过MTT法证实Bcl6具有促进肝细胞增殖的功能。结论:成功克隆了大鼠Bcl6基因，构建了Bcl6绿色荧光蛋白表达载体，在大鼠肝细胞中初步证明Bcl6具有促进肝细胞增殖和抑制凋亡的功能。
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| 关 键 词： | Bcl6；巢式PCR；质粒pEGFP-N1；克隆； 凋亡 |
| 收稿时间： | 2012-01-10 |
| 修稿时间： | 2012-02-17 |
Up-regulation of B-cell lymphoma 6 expression suppresses apoptosis of rat liver cells |
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| PAN Chuan-yong,YANG Sheng-sheng,FU Hai-long,MIAO Ming-yong and JIAO Bing-hua. Up-regulation of B-cell lymphoma 6 expression suppresses apoptosis of rat liver cells[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2012, 33(4): 349-354 |
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| Authors: | PAN Chuan-yong YANG Sheng-sheng FU Hai-long MIAO Ming-yong JIAO Bing-hua |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry and Molecular Biology, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China,Department of Biochemistry and Molecular Biology, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China,Department of Anesthesiology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,,Department of Biochemistry and Molecular Biology, Second Military Medical University,Department of Biochemistry and Molecular Biology, Second Military Medical University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bcl6 nested PCR plasmid pEGFP-N1 Clone apoptosis |
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