不同胎龄早产儿脐带血中内皮祖细胞水平及迁移能力研究

目的探讨不同胎龄早产儿脐带血中内皮祖细胞(EPC)水平及迁移能力的差异。 方法选择2014年10月至2015年7月，于四川大学华西第二医院、四川省医学科学院·四川省人民医院、成都市第一人民医院收集的47份新生儿的脐带血为研究对象。根据收集脐带血的新生儿胎龄，将其分为极早产儿组(胎龄为28～32孕周，n＝12)，早产儿组(胎龄为32～36孕周，n＝20)，以及足月儿组(胎龄>37孕周，n＝15)。将3组新生儿脐带血于诱导分化前，采用流式细胞仪检测脐带血中EPC水平；于诱导分化后，采用荧光探针标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)与异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-1)对单个核细胞进行孵育、染色，荧光显微镜下观察3组单个核细胞染色情况，判断EPC是否诱导分化成功。采用Transwell迁移实验，检测3组新生儿脐带血EPC迁移能力。统计学比较3组新生儿脐带血诱导分化前EPC水平，诱导分化后EPC迁移数量。本研究遵循的程序符合收集脐带血的上述3家医院伦理委员会所制定的伦理学标准，得到批准，脐带血获取前，均征得产妇的知情同意，并与之签署临床研究书知情同意书。3组收集脐带血的新生儿性别构成比、分娩方式及出生时Apgar评分等基本资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。 结果①流式细胞仪检测结果显示，脐带血诱导分化前，3组新生儿脐带血中，EPC水平比较，差异无统计学意义(F＝0.302，P＝0.654)。②Dil-Ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色结果显示，3组新生儿脐带血中EPC均诱导分化成功，并且随着胎龄增加，单个核细胞诱导分化为EPC的数量逐渐增多。③Transwell迁移实验结果显示，极早产儿组、早产儿与足月儿组新生儿脐带血中EPC迁移数量分别为(13.8±21.7)个/视野、(18.8±12.4)个/视野与(39.9±23.8)个/视野，3组比较，差异有统计学意义(F＝3.826，P＝0.027)。其中，极早产儿组与早产儿组EPC迁移数量，均显著低于足月儿组，差异均有统计学意义(P＝0.016、0.035)；极早产儿组EPC迁移数量，亦显著低于早产儿组，二者比较，差异亦有统计学意义(P＝0.042)。 结论随着胎龄增加，早产儿脐带血中EPC水平虽然无明显增高，但其迁移能力逐渐提高。

Research of number and migration ability of endothelial progenitor cells isolated from umbilical cord blood in preterm infants with different gestational ages