| 新生大鼠海马神经元体外氧-糖剥夺再灌注模型的建立 |
| |
| 引用本文： | 郭慧,俞丹,周晖,童煜,陶于洪.新生大鼠海马神经元体外氧-糖剥夺再灌注模型的建立[J].中华妇幼临床医学杂志,2016,12(3):286-290. |
| |
| 作者姓名： | 郭慧 俞丹 周晖 童煜 陶于洪 |
| |
| 作者单位： | 1. 610041 成都，四川大学华西第二医院儿科 |
| |
| 摘 要： | 目的体外培养新生大鼠海马神经元，建立神经元氧-糖剥夺再灌注(OGD/R)模型，为临床进一步研究新生儿缺氧缺血性脑损伤奠定基础。 方法以L-多聚赖氨酸和鼠尾胶原作为海马神经元体外培养的生长基质，分离24 h内新生SD大鼠海马，胰蛋白酶水浴振荡消化获得单个细胞，采用Neurobasal维持培养基更继续培养。培养7 d后将神经元细胞培养基更换为无糖缺血液，置于95%高纯度氮气(N2)三气培养箱内缺氧处理2 h。将其取出更换为正常培养基继续培养24 h，构建神经元OGD/R模型。然后，采用抗微管相关蛋白2-5-异硫氰酸荧光素(anti-MAP2-FITC)标记神经元，于荧光显微镜下观察建模前与建模后神经元的形态学改变，采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测微管相关蛋白(MAP)2阳性细胞存活率，对OGD/R模型进行评价。 结果荧光显微镜下观察到正常情况下神经元细胞形态结构完整，树突及轴突舒展，交织成网状。建模后，神经元突触回缩，细胞崩解，网状结构被破坏。CCK-8检测结果显示，建模后神经元细胞存活率降低。 结论此方法体外培养神经元细胞纯度在95%以上；使用无糖神经元细胞缺血液联合高纯度N2培养2 h，再更换为正常培养基培养的方法，可成功建立神经元细胞的OGD/R模型。
|
| 关 键 词： | 海马神经元 原代培养 缺血缺氧，脑 氧-糖剥夺再灌注 三气培养箱 体外 大鼠 |
| 收稿时间： | 2016-03-22 |
Establishment of the model of oxygen-glucose deprivation and reperfusion in hippocampus neurons from neonatal rat <i>in vitro</i> |
| |
| Hui Guo,Dan Yu,Hui Zhou,Yu Tong,Yuhong Tao.Establishment of the model of oxygen-glucose deprivation and reperfusion in hippocampus neurons from neonatal rat in vitro[J].Chinese JOurnal of Obstetrics & Gynecology and Pediatrics,2016,12(3):286-290. |
| |
| Authors: | Hui Guo Dan Yu Hui Zhou Yu Tong Yuhong Tao |
| |
| Institution: | 1. Department of Pediatrics, West China Second University Hospital, Sichuan University, Chengdu 610041, Sichuan Province, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Hippocampus neurons Primary cultivation Hypoxia-ischemia brain Oxygen-glucose deprivation and reperfusion Three gas incubator In vitro Rats |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中华妇幼临床医学杂志》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中华妇幼临床医学杂志》下载免费的PDF全文 |
