| 腺病毒介导的血管内皮生长因子体外靶向性转染心肌细胞 |
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| 引用本文： | 张裕东,张宝仁,梅举,陈兰英,刘红,黄盛东,钱其军,吴红平,李林芳,肖海波,王晓伟. 腺病毒介导的血管内皮生长因子体外靶向性转染心肌细胞[J]. 第二军医大学学报, 2004, 25(7): 0759-0762 |
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| 作者姓名： | 张裕东 张宝仁 梅举 陈兰英 刘红 黄盛东 钱其军 吴红平 李林芳 肖海波 王晓伟 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长海医院胸心外科,上海,200433;中国医学科学院心血管病研究所,北京,100037;东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,上海,200438 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(39970735) |
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| 摘 要： | 目的:构建以鼠心肌轻链蛋白基因(mlc-2v)为启动子、携带人血管内皮生长因子hVEGF165基因的重组腺病毒载体,检测该重组腺病毒载体对心肌细胞转染的靶向性.方法:酶切腺病毒载体PDC315自身启动子CMV,构建腺病毒载体PDC317,分别接入hVEGF165、mlc-2v基因,构建腺病毒载体PDC-mlc-hVEGF165.鉴定正确后,将PDC-mlc-hVEGF165与Lipofectamine共转染至293细胞,经同源重组获得以mlc-2v为启动子、携带hVEGF165基因的重组腺病毒Ad-mlc-hVEGF165,同步构建无靶向性的重组腺病毒Ad-hVEGF165.扩增并测定滴度后,Ad-hVEGF165、Ad-mlc-hVEGF165分别转染体外培养的心肌细胞、骨骼肌细胞及平滑肌细胞,利用ELISA、Western印迹分析等方法检测Ad-mlc-hVEGF165转染心肌细胞的靶向性.结果:构建的病毒正确,病毒滴度为2.8×109 pfu/ml.转染3 d后,Ad-hVEGF165组在各培养细胞的上清液及细胞内均检测到VEGF的表达,而Ad-mlc-hVEGF165组仅在心肌细胞中有VEGF的表达,且Ad-mlc-hVEGF165组心肌细胞分泌的VEGF要少于Ad-hVEGF165组.结论:成功构建了以mlc-2v为启动子、携带人VEGF基因的重组腺病毒Ad-mlc-hVEGF165;该重组载体能体外靶向性转染心肌细胞并使之表达VEGF.
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 心肌轻链蛋白启动子 转染 腺病毒 心肌细胞 |
| 收稿时间： | 2004-02-06 |
| 修稿时间： | 2004-05-24 |
Adenovirus-mediated vascular endothelial growth factor transfecting cardiomyocyte in vitro |
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| ZHANG Yu-Dong ,ZHANG Bao-Ren ,MEI Ju ,CHEN Lan-Ying ,LIU Hong ,HUANG Sheng-Dong ,QIAN Qi-Jun ,WU Hong-Ping ,LI Lin-Fang ,XIAO Hai-Bo ,WANG Xiao-Wei. Adenovirus-mediated vascular endothelial growth factor transfecting cardiomyocyte in vitro[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2004, 25(7): 0759-0762 |
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| Authors: | ZHANG Yu-Dong ZHANG Bao-Ren MEI Ju CHEN Lan-Ying LIU Hong HUANG Sheng-Dong QIAN Qi-Jun WU Hong-Ping LI Lin-Fang XIAO Hai-Bo WANG Xiao-Wei |
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| Affiliation: | ZHANG Yu-Dong 1,ZHANG Bao-Ren 1*,MEI Ju 1*,CHEN Lan-Ying 2,LIU Hong 2,HUANG Sheng-Dong 1,QIAN Qi-Jun 3,WU Hong-Ping 3,LI Lin-Fang 3,XIAO Hai-Bo 1,WANG Xiao-Wei 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vascular endothelial growth factor mlc-2v transfection adenovirus myocardial cell |
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