兔软骨基质支架与脂肪干细胞的生物相容性

背景：软骨基质主要为Ⅱ型胶原和葡萄糖胺聚糖，它是软骨细胞分化和发育的先天环境，能促进干细胞向软骨细胞分化。 目的：观察兔软骨基质支架与同种异体脂肪干细胞在体外的生物相容性。 设计、时间及地点：观察实验，于2007-12/2008-05在遵义医学院珠海校区中心实验室完成。 材料：取兔新鲜耳郭软骨组织在蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟的保护下利用低渗透压和Triton X-100脱去细胞成分制备软骨基质。脂肪干细胞由新西兰大白兔颈部脂肪组织经剪碎、Ⅰ型胶原酶消化并离心后获得。 方法：将2×l07 L-1的脂肪干细胞悬液0.2 mL滴在软骨基质支架表面，置于37 ℃、体积分数为0.05 CO2饱和湿度的培养箱中静置4 h后加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液培养。 主要观察指标：采用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞在支架上的黏附、生长及增殖情况，同时计算细胞黏附率，并采用二甲氧唑黄比色法检测细胞增殖趋势。 结果：扫描电镜和倒置显微镜观察到脂肪干细胞在软骨基质支架上黏附和变形，其黏附率为93.7%；苏木精-伊红染色见细胞向支架深层生长；二甲氧唑黄比色法测定细胞生长曲线表明细胞在支架上有增殖的趋势。 结论：兔软骨脱细胞基质与同种异体脂肪干细胞在体外具有良好的生物相容性。

Biocompatibility of rabbit articular cartilage acellular matrix and adipose-derived stem cells