聚合酶链反应检测HBV—DNA技术的改进与应用

目的：建立一种特异、敏感、简便、快速的方法检测血清中的HBV-DNA。方法：采用以强烈蛋白变性剂异硫氰酸胍为主的裂解液与加热变性相结合的方法快速制备血清中HBV-DNA模板，直接进行聚合酶链反应（PCR），并用Southern Blot对PCR的产物刊物特异性分析。结果：对不同含量HBV-DNA的阳性血清测试结果表明本法检测水平达到10^5拷贝/ml，其敏感性与蛋白酶K消化法PCR相当，但较NP40变性法PCR及斑点法高。结论：本法操作简单，不易污染，具有较高的特异性及敏感性，值得临床推广应用。