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大鼠心室肌HCN4质粒在HEK293细胞的表达及电流特征
引用本文:刘丹妮,高小方,姚成立,李泱.大鼠心室肌HCN4质粒在HEK293细胞的表达及电流特征[J].宁夏医科大学学报,2008,30(2):146-150.
作者姓名:刘丹妮  高小方  姚成立  李泱
作者单位:刘丹妮(宁夏回族自治区人民医院,银川,750021);高小方(宁夏回族自治区人民医院,银川,750021);姚成立(银川市第一人民医院,银川,750001);李泱(解放军总医院老年心血管病研究所,北京,100853)
摘    要:目的 研究大鼠心室肌细胞超极化环核苷酸门控阳离子通道(HCN4)基因瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293)表达和通道电流特征.方法 利用脂质体介导大鼠HCN4基因pTracer-CMV-GFP穿梭载体,转染HEK293细胞进行扩增,用逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)检测HCN4 mRNA表达,采用全细胞膜片钳技术记录HEK293细胞上HCN4电流.结果 大鼠起搏通道基因瞬时转染HEK293细胞,记录到一系列超极化内向离子流,该电流呈电压、时间依赖性,没有明显的失活,在-150 mV时电流幅值为(540±24.1)pA,电流密度为(9.6±0.7)pA/pF(n=12),半激活电压(V1/2)为(-105.7±12.0)mV,稳态激活曲线斜率(k)为-15.7mV,HCN4电流翻转电位为(-84.0±7.9)mV.结论 应用脂质体转染方法成功进行了起搏通道HCN4基因的异源性表达.

关 键 词:超极化激活环核苷酸门控阳离子通道  异源性表达  膜片钳  大鼠
文章编号:1005-8486(2008)02-0146-04
修稿时间:2007年11月13

Current Characteristics and Expression of HCN4 Myocytes in Rat Ventricular Myocytes into HEK293
LIU Dan-ni,GAO Xiao-fang,YAO Chen-li,LI Yang.Current Characteristics and Expression of HCN4 Myocytes in Rat Ventricular Myocytes into HEK293[J].Journal of Ningxia Medical College,2008,30(2):146-150.
Authors:LIU Dan-ni  GAO Xiao-fang  YAO Chen-li  LI Yang
Abstract:
Keywords:
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