| 慢病毒介导的Isl1基因在人骨髓间充质干细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 王银芬,李伟强,方榕,刘佳,杨达雅,胡承恒,伍贵富,项鹏.慢病毒介导的Isl1基因在人骨髓间充质干细胞中的表达[J].中华生物医学工程杂志,2011,17(3). |
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| 作者姓名： | 王银芬 李伟强 方榕 刘佳 杨达雅 胡承恒 伍贵富 项鹏 |
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| 作者单位： | 1. 中山大学附属第一医院心血管研究所卫生部辅助循环重点实验室,广州,510080
2. 中山大学干细胞与组织工程研究中心,广州,510080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目，国家自然科学基金青年基金，广东省科技计划 |
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| 摘 要： | 研究慢病毒介导的Isl1基因在人骨髓间充质干细胞(hMSC)中的表达情况,并检测其下游基因Nkx2.5和Flk-1的表达。方法 多位点Gateway载体构建技术构建2K7puro/EF 1α-Isl1慢病毒表达载体(由EF1α启动子启动Isl1基因表达)。包装细胞293FT细胞获得慢病毒,再转染至hMSC。利用嘌呤霉素抗性筛选出Isll阳性细胞。应用RT-PCR、Western blotting检测hMSC中Isl1基因在转染后1～6周的mRNA和1～4周的蛋白表达情况。结果 成功构建了慢病毒载体EF1α-Isl1,转染后hMSC中检测出Isl1基因mRNA和蛋白的表达,其mRNA表达随着培养时间延长而上调,第3周表达量(0.65±0.14)较1、2周增多(0.36±0.09,0.37±0.05,均P＜0.05),3周后表达趋于稳定。转染后在无任何诱导剂的情况下,检测到Isl1下游基因Nkx2.5的表达,但尚未见Flk-1的表达。结论通过慢病毒载体将Isl1基因转染hMSC后,可获得长期稳定的表达,并在无任何诱导剂的情况下,能促进下游基因Nkx2.5的表达。
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| 关 键 词： | 慢病毒属 Isl1基因 入骨髓间充质干细胞 转染 遗传载体 |
Expression of lentivirus-mediated Isl1 gene in human mesenchymal stem cells |
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| WANG Yin-fen,LI Wei-qiang,FANG Rong,LIU Jia,YANG Da-ya,HU Cheng-heng,WU Gui-fu,XIANG Peng.Expression of lentivirus-mediated Isl1 gene in human mesenchymal stem cells[J].Chinese Journal of Biomedical Engineering,2011,17(3). |
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| Authors: | WANG Yin-fen LI Wei-qiang FANG Rong LIU Jia YANG Da-ya HU Cheng-heng WU Gui-fu XIANG Peng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lentivirus Isl1 gene Human mesenchymal stem cells Transfection Genetic vector |
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