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| 兔出血症病毒VP60基因在昆虫细胞中形成病毒样颗粒及其特性 | |
| 引用本文： | 刘怀然,刘家森,胡迎东,陈洪岩,单安山,曲连东. 兔出血症病毒VP60基因在昆虫细胞中形成病毒样颗粒及其特性[J]. 中国比较医学杂志, 2007, 17(8): 448-454,F0003 |
| 作者姓名： | 刘怀然 刘家森 胡迎东 陈洪岩 单安山 曲连东 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部实验动物质量监督检验测试中心,哈尔滨,150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部实验动物质量监督检验测试中心,哈尔滨,150001;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110161 3. 东北农业大学动物科技学院,哈尔滨,150030 |
| 基金项目： | 中央级科研院所科技基础性工作专项计划;黑龙江省博士后资金项目 |
| 摘 要： | 目的将兔出血症病毒（RHDV）VP60全长基因在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达，验证重组蛋白形成病毒样颗粒（VLPs）的能力及其生物学特性，探讨VLPs作为检测抗原及亚单位疫苗的潜力。方法用Bac-to-Bac系统体外表达RHDVVP60全长基因。以免疫荧光及Western blotting检测蛋白表达情况及确定蛋白最佳表达条件；免疫电镜观察VLPs形态，并对VLPs的血凝性、免疫原性进行检测。结果SDS-PAGE电泳分析表明，表达的重组蛋白分子量大小约为68KDa，在免疫荧光、琼脂扩散、ELISA试验中均与RHD多克隆抗血清特异性反应；接种重组病毒的Sf9细胞裂解液在电镜下可观察到与RHDV形态相似的VLPs；该VLPs可凝集人“O”、“B”型红细胞，凝集可被RHD多克隆抗血清所抑制；含VLPs的Sf9细胞裂解液可不经纯化用作间接ELISA抗原，所建立的ELISA方法与进口商品化试剂盒相比，特异性良好，敏感性、检出率稍低；将含VLPs的细胞裂解液加氟氏佐剂免疫兔，HI效价可达1∶40，可经受致死量病毒攻击。结论RHDV-VLPs的获得及其良好的免疫原性，为RHD血清学检测试剂的标准化、亚单位疫苗研制应用奠定基础，同时在转移载体及RHDV受体方面研究亦有潜在应用价值。 |
| 关 键 词： | 兔出血症病毒 基因,VP60 昆虫细胞 病毒样颗粒 |
| 文章编号： | 1671-7856（2007）08-0448-07 |
| 修稿时间： | 2007-06-10 |
Self-Assembly of VP60 Gene of Rabbit Hemorrhagic Disease Virus into Virus-Like Particles in Insect Cells and Their Characterization |
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| LIU Huai-ran,LIU Jia-sen,HU Ying-dong,CHEN Hong-yan,SHAN An-shan,QU Lian-dong. Self-Assembly of VP60 Gene of Rabbit Hemorrhagic Disease Virus into Virus-Like Particles in Insect Cells and Their Characterization[J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2007, 17(8): 448-454,F0003 | |
| Authors: | LIU Huai-ran LIU Jia-sen HU Ying-dong CHEN Hong-yan SHAN An-shan QU Lian-dong |
| Abstract: | |
| Keywords: | Rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) VP60 gene Insect cell Virus-like particles VLPs |
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