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Id1启动子的荧光素酶报告基因载体的构建及其在肝癌HepG2细胞中的活性检测
引用本文:丁睿,韩霜,雷婷,刘杰,窦科峰.Id1启动子的荧光素酶报告基因载体的构建及其在肝癌HepG2细胞中的活性检测[J].第四军医大学学报,2007,28(9):798-801.
作者姓名:丁睿  韩霜  雷婷  刘杰  窦科峰
作者单位:1. 第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西安,710033
2. 第四军医大学西京医院全军消化病研究所,陕西,西安,710033
摘    要:目的:扩增Id1启动子基因,构建Id1启动子的报告基因载体. 方法:通过PCR及双酶切方法,从HepG2细胞基因组DNA中获得Id1基因编码序列上游包含不同长度碱基的两段Id1启动子序列;分别克隆到报告基因pGL3-enhancer载体上,构建包含两段不同长度Id1启动子的报告基因载体;用脂质体转染法将两报告基因载体分别转染至肝癌HepG2细胞系;采用双荧光素酶报告基因系统评估Id1启动子活性. 结果:经PCR方法扩增出大小分别为1096 bp和266 bp的两段不同长度的Id1启动子片段,序列测定其编码序列及读框正确,酶切鉴定亚克隆序列正确. 瞬时转染HepG2后经报告基因检测,两段启动子均具有转录活性. 结论:成功构建了Id1启动子的报告基因载体,为进一步研究Id1启动子和肝癌的关系奠定了实验基础.

关 键 词:分化抑制因子(Id)  启动子  双荧光素酶报告基因    肝细胞
文章编号:1000-2790(2007)09-0798-04
修稿时间:2006-12-31

Construction of luciferase reporter gene vectors containing Id1 promoter region and Id1 promoter activity in HepG2 cells
DING Rui,HAN Shuang,LEI Ting,LIU Jie,DOU Ke-Feng.Construction of luciferase reporter gene vectors containing Id1 promoter region and Id1 promoter activity in HepG2 cells[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2007,28(9):798-801.
Authors:DING Rui  HAN Shuang  LEI Ting  LIU Jie  DOU Ke-Feng
Abstract:
Keywords:Id  promoter  luciferase reporter gene  HCC
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