低氧刺激对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响及其机制的探讨

目的:探讨模拟低氧环境对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及低氧诱导因子(HIF-1α)、基质衍生因子-1(SDF-1)和趋化因子受体4(CXCR4)表达的影响。方法:常规复苏、传代培养MCF-7细胞,待细胞对数期生长后分别用50、100、150和200μmol/L CoCl2处理细胞,并于12、24和48h收集细胞进行以下指标检测。MTT比色法检测细胞增殖抑制率;RT-PCR检测HIF-1α、SDF-1和CXCR4的mRNA表达;蛋白质印迹法检测HIF-1α和CXCR4在蛋白水平的表达;免疫荧光法测定150μmol/L CoCl2经不同时间处理后MCF-7细胞中SDF-1的表达。结果:低氧模拟微环境中,应用CoCl2处理MCF-7细胞后有较明显抑制作用,实验中以CoCl2(50、100、150和200μmol/L)处理MCF-7细胞24h后抑制率分别为(54.62±0.07)%、(65.21±0.03)%、(80.15±0.01)%和(94.51±0.01)%;以CoCl2150μmol/L浓度处理细胞12、24和48h后,抑制率分别为(70.83±0.03)%、(80.15±0.01)%和(89.27±0.03)%;RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,HIF-1α、SDF-1和CXCR4的mRNA的表达及HIF-1α和CXCR4蛋白的表达与低氧时间和CoCl2浓度有关,以低氧处理细胞24h及CoCl2浓度150μmol/L时最明显;免疫荧光结果表明CoCl2150μmol/L时MCF-7细胞SDF-1蛋白的表达随时间延长有增加。结论:CoCl2模拟低氧后,细胞生长受抑制呈时间和浓度依赖性;CoCl2浓度在50～150μmol/L时,HIF-1α、SDF-1和CXCR4在mRNA和蛋白水平表达上调并呈现时间和浓度依赖性。

Effects of hypoxia on the proliferation and its underlying mechanism in human breast cancer MCF-7 cells