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稳定表达RFX6基因肝癌细胞株的建立
引用本文:王莉,黄品助,邱际亮,廖亚帝,李斌奎,元云飞. 稳定表达RFX6基因肝癌细胞株的建立[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2013, 20(13): 968-971
作者姓名:王莉  黄品助  邱际亮  廖亚帝  李斌奎  元云飞
作者单位:中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室,广东广州,510060
摘    要:目的:建立稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株。方法:构建人源RFX6基因的重组质粒(pLNCX2-RFX6),pVSV-G质粒分别与pLNCX2-RFX6和空载体pLNCX2共转染至GP2-293细胞中进行包装,并用包装的逆转录病毒感染人肝癌QGY-7703细胞株,G418筛选出阳性克隆。RT-PCR和蛋白质印迹法验证稳定细胞株RFX6基因表达情况。采用Image J软件进行灰度值分析比较两株细胞系的差异。结果:在QGY-7703-pLNCX2-RFX6和QGY-7703-pLNCX2细胞中,RFX6/18SmRNA电泳条带灰度比值分别为5.044 0±1.384 0和0.357 2±0.407 9,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/18S是QGY-7703-pLNCX2细胞的14.1倍,差异有统计学意义,t=4.143,P<0.05;而在两细胞株中,RFX6/GAPDH的蛋白质印迹条带灰度值分别为1.391 4±0.141 3和0.127 8±0.037 3,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/GAPDH是QGY-7703-pLNCX2细胞的10.9倍,差异有统计学意义,t=14.966,P<0.05。结论:成功构建稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株,为研究RFX6基因在肝癌细胞中的功能奠定了基础。

关 键 词:肝肿瘤  RFX6  逆转录病毒  稳定细胞株  肝癌细胞QGY-7703  印迹法,蛋白质

Construction of stable human hepatoma cell line QGY-7703with over-expression of RFX6
WANG Li,HUANG Pin-zhu,QIU Ji-liang,LIAO Ya-di,LI Bin-kui,YUAN Yun-fei. Construction of stable human hepatoma cell line QGY-7703with over-expression of RFX6[J]. Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment, 2013, 20(13): 968-971
Authors:WANG Li  HUANG Pin-zhu  QIU Ji-liang  LIAO Ya-di  LI Bin-kui  YUAN Yun-fei
Affiliation:State Key Laboratory of Oncology in Southern China,Sun Yat-sen University Cancer Center,Guangzhou 510060, P.R.China
Abstract:
Keywords:
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