| 曲古抑菌素干预骨髓间充质干细胞向心肌细胞特化体外实验 |
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| 引用本文： | 杨舸,朱静,田杰,陈沅,冯川,赵莉莉,张晓萍. 曲古抑菌素干预骨髓间充质干细胞向心肌细胞特化体外实验[J]. 重庆医科大学学报, 2009, 34(4) |
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| 作者姓名： | 杨舸 朱静 田杰 陈沅 冯川 赵莉莉 张晓萍 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院心血管内科,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的:在体外以新生大鼠心肌细胞(Cardiomyocytes,CM)与骨髓间充质干细胞((Mesenchymal stem cells,MSCs)共同培养的方式模拟体外心肌微环境,研究间质干细胞在HDAC酶抑制剂曲古抑菌素(Trichostatin A,TSA)干预后乙酰化酶活性与MSCs向心肌细胞特化之间的联系.方法:分离大鼠MSCs将已标记的MSCs与心肌细胞、分别加入不同浓度TSA干预后的MSCs与心肌细胞混合培养.贴壁法分离大鼠MSCs在体外培养纯化后进行细胞标记.培养至第4代.根据实验需要分为3组:阳性对照组,实验组,阴性对照组.用4.6-二乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)对核进行双标.分别在共培养1周后用免疫荧光染色检测MSCs细胞中的心肌结构功能蛋白:肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,MHC)、心肌组织缝隙连接的特异性组成蛋白质Connexin43(Cx43)的表达情况.结果:①MSCs与搏动的心肌细胞共培养1周,MSCs开始出现心肌样分化说明建立了心肌微环境;②阳性对照组中,MSCs经TSA干预48 h后与心肌细胞混合培养.出现心肌样分化并表达心肌结构功能蛋白表达.③阴性对照组中的部分MSCs可少量表达心肌结构功能蛋白.在共培养的7 d,经TSA诱导后经Brdu-DAPI双标MSCs的核,MHC和Cx43荧光显示分化率与阳性对照组的分化率有显著差别.结论:MSCs与经HDAC酶抑制剂干预后的MSCs在心肌微环境中,HDAC酶抑制剂对MSCs向心肌样细胞的特化有促进作用,提示乙酰化酶活性与细胞特化之间的存在联系.
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| 关 键 词： | 骨髓间充质干细胞 心肌细胞 诱导分化 去乙酰化酶抑制剂 |
The specialization of mesenchymal stem cells to cardiac muscle cells with trichostatin A intervention in the simulated microenvironment |
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