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泰泽病原体单克隆抗体的制备和鉴定
引用本文:陈园生,刘星,张丽芳,李红.泰泽病原体单克隆抗体的制备和鉴定[J].中国比较医学杂志,2003,13(5):269-272.
作者姓名:陈园生  刘星  张丽芳  李红
作者单位:中国医学科学院,中国协和医科大学实验动物研究所,北京,100021
摘    要:目的 制备多种抗泰泽病原体的单克隆抗体 ,用于该菌隐性感染的检测。方法 用含泰泽病原体的大鼠肝匀浆免疫BALB c小鼠 ,采用杂交瘤技术和间接免疫荧光方法筛选抗该菌的单克隆抗体 ;运用免疫电镜、Westernblotting和免疫双向扩散试验确定单克隆抗体的抗原定位和相对分子质量及IgG亚类型。结果 共筛选出 5种单克隆抗体 (M2、M3、M4、M5和M7)。免疫电镜表明 :抗体M2、M4、M5、和M7与泰泽病原体的细胞壁结合 ,而M3为抗菌毛的单克隆抗体 ;Westernblotting结果表明 :抗体M2、M3和M4与相对分子质量约为 6 4× 10 3的抗原有特异性结合 ,M5与M7与相对分子质量约为 4 1× 10 3的抗原特异性结合 ;M2、M5、M7为IgG1 ,M3为IgG2b,M4为IgG2a。对模拟自然感染大鼠考的松激发试验阳性为 2 10 ,而单克隆抗体为诊断抗体的IFA则为 8 10。除M7外 ,4种单抗不与清洁级以上大鼠回盲部细菌发生反应。结论 筛选的杂交瘤细胞能稳定分泌抗体 ,其IFA效价达 1∶10 2 4 ;表明这些抗体具有高效价、较高特异性和敏感性。

关 键 词:泰泽病原体  单克隆抗体  制备  鉴定  敏感性  特异性
文章编号:1671-7856(2003)05-0269-04
修稿时间:2002年7月3日

Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies of Tyzzer Organism
CHEN Yuan-sheng,LIU Xing,ZHANG Li-fang,LI Hong.Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies of Tyzzer Organism[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2003,13(5):269-272.
Authors:CHEN Yuan-sheng  LIU Xing  ZHANG Li-fang  LI Hong
Abstract:
Keywords:Tyzzer organism  Monoclonal antibodies  Sensitivity and specificity
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