| 人类白细胞抗原B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达 |
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| 引用本文： | 陈占昆,吕厚山,王东,蒋东芳,丁海明. 人类白细胞抗原B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达[J]. 中华风湿病学杂志, 2005, 9(6): 321-324 |
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| 作者姓名： | 陈占昆 吕厚山 王东 蒋东芳 丁海明 |
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| 作者单位： | 100044,北京大学关节病诊疗研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(3007064) |
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| 摘 要： | 目的研究人类白细胞抗原(HLA)-B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达。方法应用显微注射技术将HLA-B2704基因注入C57BL/6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F0代受精卵,出生动物进行聚合酶链反应(PCR)筛选及Southern杂交鉴定。阳性者进行反转录(RT)-PCR和流式细胞光度术检测其在mRNA和蛋白水平的表达。结果101只F0代仔鼠中,10只F0代仔鼠基因组中有HLA-B2704基因整合。其中昆明鼠×昆明鼠F0代3只,整合率为4.7%,C57BL/6×昆明鼠F0代7只,整合率为18.9%(字2检验,P<0.05)。阳性小鼠的皮肤、结肠、睾丸和脾脏组织中均有HLA-B2704基因的mRNA水平表达,其外周血淋巴细胞膜上HLA-B2704基因的蛋白表达为7.87%(直方图统计表,5%以上为阳性)。结论尽管受精卵的注射成活率差异无统计学意义,在注射浓度相同的情况下,含有C57BL/6基因背景的受精卵更易整合外源基因,而单纯昆明鼠的受精卵不易接受外源基因。C57BL/6×昆明鼠F0代比单纯昆明鼠F0代更适合于转基因动物的制备。HLA-B2704的重链分子与小鼠茁2微球蛋白结合的复合物不稳定,不易于在细胞表面表达。
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| 关 键 词： | 人类白细胞抗原 4基因 转基因小鼠 聚合酶链反应（PCR） C57BL／6 Southern杂交 流式细胞光度术 外周血淋巴细胞 显微注射技术 mRNA水平 细胞表面表达 昆明鼠 外源基因 HLA x^2检验 转基因动物 受精卵 方法应用 蛋白水平 基因整合 |
| 修稿时间： | 2004-11-08 |
Integration and expression of HLA-B2704 gene in transgenic mice |
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| CHEN Zhan-kun,U Hou-shan,WANG Dong,JIANG Dong-fang,DING Hai-ming. Integration and expression of HLA-B2704 gene in transgenic mice[J]. Chinese Journal of Rheumatology, 2005, 9(6): 321-324 |
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| Authors: | CHEN Zhan-kun U Hou-shan WANG Dong JIANG Dong-fang DING Hai-ming |
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